T4 RNA连接酶实验方法

T4 RNA连接酶实验方法
〖英文名称〗：T4 RNA Ligase

〖分子量〗：43.6kDa，单体

〖级别〗：BR

〖来源：含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌

〖浓度〗：10u/ul

〖活性定义〗：是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量

〖酶活性分析混合物〗：50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端）

〖保存液组分〗：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油

〖10×反应缓冲液〗：500mM HEPES-NaOH(PH8.0，25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT

〖YZ剂〗：金属螯合剂、SH基团修饰试剂

〖失活〗：70℃加热10分钟

〖质量控制〗：测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染

〖备注〗：反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型，推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml

〖性状(以下信息仅供参考)〗：重组酶，催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接（5'-磷酸基团和3'-羟基末端），底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA，分子之间的Z小的连接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子内连接的Z小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液

〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)连接RNA和RNA ；RNA3'-末端标记胞嘧啶3'，5'-双[a-32P]磷酸； tRNA的特异性修饰；合成寡核苷酸的环化；寡聚脱氧核糖核苷酸与单链cDNA连接，用于5'RACE（快速扩增cDNA末端）分析

〖保存〗： -20°C

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CIN-1Agar
大鼠肝癌细胞;RH-35

TPO Others Human 人 Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

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SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 肾上腺皮质瘤细胞,SW 13细胞 TT(人甲状腺癌细胞)

小鼠小胶质细胞;BV2

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0391NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC tRNA

SKBr-2HL细胞，人癌细胞 鸡胚原代肝细胞,CEL细胞 SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

MuM-2C(人眼脉络色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人脐静脉内皮细胞(预选型) > 1 mio.cells 角质细胞培养基KM-acf
CL-0391NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞)5×106cells/瓶×2

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC tRNA

SKBr-2HL细胞，人癌细胞 鸡胚原代肝细胞,CEL细胞 SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

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HUVEC pre-screened Pellet 人脐静脉内皮细胞(预选型) > 1 mio.cells 角质细胞培养基KM-acf

T4 RNA连接酶实验方法Hep-2, 人喉癌细胞系 Human

人胚肾细胞;293 [HEK-293]

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

正常大鼠肾细胞;NRK-52E 胸膜细胞瘤，SMC-1细胞 RIN-m细胞，褐鼠胰岛素瘤上皮细胞

小鼠脑脊神经元MN-r

RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)