T4 DNA连接酶实验方法

T4 DNA连接酶实验方法〖英文名称〗：T4 DNA Ligase

〖CAS号〗：9015-85-4

分子量：55.3kDa，单体

〖级别〗：BR

来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量） 

YZ剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈YZT4 DNA Ligase活性

失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟

注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴〖保存〗；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯方抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物

质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力

〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性

〖保存〗： -20°C

公司产品经无数次市场验证，若出现非人为操作实验出不了结果或产品质量问题可无条件换货或退货。欢迎各位新老客户惠顾！

T4 DNA连接酶实验方法储存条件：
避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险 产品可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋！受热、受潮、受光后易丧失活力,保存期短,因此贮存和运输条件比较苛刻。
主营业务：盒、细胞凋亡检测试剂盒、分子生物学试剂盒。
生化试剂：原装进口生化试剂、进口
试剂盒：酶联免疫试剂盒、免疫印迹试剂盒、免疫组化试剂原装生化试剂、国产生化试剂。
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