大鼠心肌细胞;H9c2(2-1)细胞培养培养过程:
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大鼠心肌细胞;H9c2(2-1)细胞培养来源可靠,活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
大鼠心肌细胞;H9c2(2-1)细胞培养细胞培养实验常见问题总结:
1.一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制。
2.快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?
我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞。
3.可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。
4.可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
5.培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减。
6. 何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换。
7.购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集。
8.购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
9.大鼠心肌细胞;H9c2(2-1)细胞培养购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久。
10. 收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
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YMS10778B 睾酮(T)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human DeYMdroepiandrosterone sulfate,DHEA-S Elisa试剂盒
YMS10779B 游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Testoterone,T Elisa试剂盒
YMS10780B 雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Free Testoterone,F-TESTO Elisa试剂盒
YMS10781B 雌三醇(E3)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Androstenedione,ASD Elisa试剂盒
YMS10782B 17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Estriol,E3 Elisa试剂盒
YMS10783B 三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human 17-YMdroxyprogesterone,17-OHP Elisa试剂盒
YMS10784B 甲状腺素(T4)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Tri-iodotYMronine,T3 Elisa试剂盒
YMS10785B 游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human tYMroxine,T4 Elisa试剂盒
YMS10786B 游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Free TYMroxine,FT4 Elisa试剂盒
YMS10787B 新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒,96T/48T kit说明书 Human Free Tri-iodotYMronine Indes,Free-T3 Elisa试剂盒
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