核酸印迹膜染液100mL成分使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 完全将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用苯酚抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
核酸印迹膜染液100mL成分产品介绍:

核酸印迹膜染液100mL成分确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的Z佳洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋Z好预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在Z佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
杂交步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。
L-异白安酸L-IsoleucinepR1g
A2203-250MGAcetosyringone 乙酰丁香酮2478-38-8250mg43
ER0551MvaI (BstNI)2000 units2
SM1103FastRuler Low Range DNA Ladder, ready-to-use
二甲基亚砜500ml
柠檬酸钠wo7ium citrateAR500g
SM0191Lambda DNA/EcoRI+HindIII Marker239
C0887-50GCesium choride 录化铯7647-18-850G
2-脱氧胸苷1g
橙黄G25g
2-溴丙酸 2-bromo-propionic acid CP 25ml
2-乙基己酸 2-ethyl hexanoic acid CP 50ml
3-(N-啉)丙烷磺酸 3-(N-morpholine)propane sulfonic acid BR 25g
3,4-二羟基 3,4-Dihydroxy CP 10g
巴卡丁 III(标准品) Baccatin III 27548-93-2 HPLC>98%,标准品
巴氯芬 Baclofen 1134-47-0 纯度>99,USP
巴氯芬 Baclofen 1134-47-0 纯度>99,USP
巴氯芬 Baclofen 1134-47-0 纯度>99,USP
小鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA试剂盒 ,英文名: SP-B ELISA Kit
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA检测试剂盒RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T
人白介素-21(IL-21)免疫试剂盒 Human IL-21 ELISA Kit
英文名称MouseTransformingGrowthfactorβ1ELISAkit小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)规格:96T/48T
PDGF-B(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
PorcinesolubleVascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISA试剂盒猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Mousecalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA检测试剂盒MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
人抗磷脂酰甘油抗体(IgA)免疫试剂盒 Human Phosphatidylglycerol Antibody IgA ELISA Kit
RabbitLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit兔钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞αSMA蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次
humanUltrasensitivityThyroxine,u-T4ELISA试剂盒人高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鹅孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人循环免疫复合物(CIC)免疫试剂盒 Human circulating immune complex,CIC ELISA Kit
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒 ,英文名: AECA ELISA Kit
RatHexokinase,HKELISA试剂盒大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanfibrinopeptideB,FPBELISA试剂盒人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInfluenzavirusesIgG,FLUELISAKit人流感病毒抗体IgG(FLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T
核酸印迹膜染液100mL成分大鼠维生素D2(VD2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人维生素D3(VD3)免疫试剂盒 Human Vitamin D3,VD3 ELISA kit
酰基转移酶(AAT)测试盒 可见分光光度法 10管/9样
ratprolactin,PRLELISA试剂盒大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumaninterferonRegulatoryFactor,IRFELISA试剂盒人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELISAKit人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒规格:96T/48T