柱式内毒素清除剂1.5mL特点产品介绍:
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柱式内毒素清除剂1.5mL特点导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human intercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒
humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA试剂盒人环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织FGFR3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISAKit人肝癌抗原(PHC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠玻连蛋白(VTN)ELISA试剂盒 ,英文名: VTN ELISA Kit
Rat VLA (VLA) ELISA Kit 大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒
Ratsignaltransduction-Smad1ELISAKit 大鼠信号转导分子(Smad1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
COXIgM柯萨奇病毒IgM混合型(间接法二步法)
细胞乙醇脱氢酶III(谷胱苷肽-依赖性甲醛脱氢酶)活性比色法定量检测试剂盒20次
RatcomplementfactorH,CFHELISAKit大鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠雌三醇(E3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人免疫球蛋白结合蛋白(BIP)免疫试剂盒 Human immunoglobulin binding protein,BIP ELISA KIT
MousetrypsinELISAKit小鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
石蜡切片细胞细胞有丝分裂荧光显微镜检测试剂盒10/20次
HumanProgesterone,PROGELISA试剂盒人孕激素/孕同(PROG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanthrombin-antithrombincomplex,TAISAKit人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
KM3, 人多发性瘤细胞 Human
非洲绿猴肾细胞;CV-1
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞 E14细胞,129小鼠ES细胞
人心脏成纤维细胞-成人心房HCF-aa
CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0124IMR-32(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL
COC1/CDDP细胞,人卵巢癌顺铂耐药株 大黄鱼肾细胞,PCK细胞 脐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2
HTS
ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0400NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2
人小脑颗粒细胞微小RNAHCGC miRNA5 μg
MCF-7/ER36细胞,人癌细胞 小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠,SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞
MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM
CL-0400NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2
ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人小脑颗粒细胞微小RNAHCGC miRNA5 μg
MCF-7/ER36细胞,人癌细胞 小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠,SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞
MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM
柱式内毒素清除剂1.5mL特点SF17(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌细胞)
CL-0071CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白
小鼠结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL