一步法大提质粒 DNAout5次价格特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
一步法大提质粒 DNAout5次价格导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
人重组激活基因1(RAG-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human inducible nitric oxide synthase (iNOS) ELISA Kit 人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒
HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit 人癌标志物CA242ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33ELISA试剂盒人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒20次
humanlymphocyteantigen6complexlocusA,Ly6aELISAKit人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠补体成分9(C9)ELISA试剂盒 ,英文名: C9 ELISA Kit
Human alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 人αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒
Ratp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 大鼠P53(P53)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCP/CER(MouseCeruloplasmin)ELISAKit小鼠铜蓝蛋白规格:48T/96T
细胞一氧化氮(NO)活性比色法定量检测试剂盒50次
RatC-PeptideELISAKit大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒 ,英文名: VLA ELISA Kit
Mouse 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA Kit 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLEPR(HumanLeptinReceptor)ELISAKit人瘦素受体规格:48T/96T
通用型HRP-DAB底物显色试剂盒10次
ELISAKitFSH猴子促卵泡素规格:48T/96T
CNE1, 人鼻咽癌细胞系 Human
人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1 结肠腺癌细胞,LS 174T细胞 RPC细胞,大鼠垂体细胞
前脂肪细胞分化培养基PADM
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CM-H045人肝动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
TSPAN31 Others Human 人 TSPAN31 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人少突胶质前体细胞-贴壁生长HOPC
CCC-ESF-1细胞,人胚胎皮肤成纤维细胞 人癌细胞,MDA-MB-415细胞 口腔角质细胞培养基OKM
瘤牛皮肤细胞;BIN-S1
KLK1 Others Human 人 KLK-1 / Kallikrein-1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CNKSR3 Others Human 人 MAGI1 / CNKSR3 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0373KiMA(人胚肾上皮细胞系)5×106cells/瓶×2
人肝细胞总RNAHH tRNA
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3 B淋巴细胞,WEHI 22.1细胞 M5076细胞,小鼠网织细胞肉瘤
人胚肺二倍体细胞;HEL-2
HA Others H11N2 甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0373KiMA(人胚肾上皮细胞系)5×106cells/瓶×2
CNKSR3 Others Human 人 MAGI1 / CNKSR3 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人肝细胞总RNAHH tRNA
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3 B淋巴细胞,WEHI 22.1细胞 M5076细胞,小鼠网织细胞肉瘤
人胚肺二倍体细胞;HEL-2
HA Others H11N2 甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人海马星形胶质细胞(HA-h)(1×106) 人脑血管平滑肌细胞 Human
CM-H052人胎盘绒膜细胞完全培养基100mL
IL9R Others Rat 大鼠 IL9R / Interleukin 9 receptor 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
A-431人表皮癌细胞 Human epidermoid carcinoma A-431 cells DMEM+10%FBS
IL5 Protein Human 重组人 IL5 / Interleukin 5 蛋白
小鼠脉络膜血管细胞完全培养基 100mL
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