鼻腔采样拭子 50 支效果产品介绍:
鼻腔采样拭子 50 支效果导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
大鼠白介素2(IL2)ELISA试剂盒 ,英文名: IL2 ELISA Kit
Human gamma aminobutyric acid (GABA) ELISA Kit 人γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒
PlantIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit 植物吲哚乙酸(IAA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCK-MB(HumanCreatineKinaseMBisoenzyme)ELISAKit人肌酸激酶同工酶MB规格:48T/96T
细胞脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量检测试剂盒20次
RatBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit大鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)ELISA试剂盒 ,英文名: LRP8 ELISA Kit
Human FMS like tyrosine kinase 3 (Flt3) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒
Ratmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAkit 大鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCyPA(MousecyclophilinA)ELISAKit小鼠嗜环蛋白/亲环素A规格:48T/96T
细胞色素P450亚酶CYP2A6(COUMARIN)活性荧光定量检测试剂盒20次
RatFractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 ,英文名: LTB4 ELISA Kit
Mouse interleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) 48T/96T 进口分装
CLIAKitfori-PTH(MouseintactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲状旁腺素规格:48T/96T
通用型非蛋白/游离巯基含量比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitADP大鼠脂联素规格:48T/96T
A2780/Taxol? 人卵巢癌紫杉醇耐药株
CL-0139Li-7(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2
11. 前列腺细胞系统
人小细胞肺癌;NCI-H2227 大鼠视网膜色素上皮细胞完全培养基 100mL
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人癌细胞;MCF 7B
人囊内壳细胞(HHirSC)( 5×105 )
CL-0447SW 1353(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人宫颈癌细胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
P815 小鼠肥大细胞癌细胞
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / Trappin-2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0071CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白
SF17(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌细胞)
CL-0071CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
小鼠结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白
SF17(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌细胞)
鼻腔采样拭子 50 支效果FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
CRIP2 Others Human 人 CRIP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 小鼠杂交瘤细胞,7F2细胞 EL4. IL-2(淋巴瘤细胞)
人结直肠腺癌细胞;HCT-8 [HRT-18]
原代系膜细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml