菌落 PCR 试剂盒 2.050 次供应

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次供应产品及特点：
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次供应规格及成分：

详细介绍：

使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

细胞名称 种属

CM-M051小鼠颈上皮细胞完全培养基100mL

人视网膜色素上皮细胞(HRPEpiC)(5×105 )

小鼠肥大细胞瘤细胞;P815 小鼠导管上皮细胞完全培养基 100mL

小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP

GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS;Vero-HCV-NS

人骨骼肌细胞 (HSkMC)( 5×105 )

CL-0243WI-38(人胚肺细胞)5×106cells/瓶×2

人导管癌细胞;ZR-75-30 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL

NFS-60 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性

VTN Others Mouse 小鼠 Vitronectin / VTN 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞)5×106cells/瓶×2

人食道平滑肌细胞裂解物HESMCL

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴细胞白血病细胞，Jurkat,Clone E6-1细胞 MPC-83细胞，小鼠腺泡细胞癌细胞

人肝永生化细胞;THLE-3

COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞)5×106cells/瓶×2

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)

人食道平滑肌细胞裂解物HESMCL

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴细胞白血病细胞，Jurkat,Clone E6-1细胞 MPC-83细胞，小鼠腺泡细胞癌细胞

人肝永生化细胞;THLE-3

COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

MUCAP试剂4ml*2支/盒用于沙门氏菌快速筛选

弗拉特氏菌培养基 250g 用于弗拉特氏菌平板计数

多粘菌素B 2.5万单位/支*5 添加于100mlHB4131中

豆粉琼脂血液250g/瓶每培养基中添加5ml~070血琼脂平板，用于细菌培养或溶血试验incubationmedia豆粉琼脂血液250g/瓶每培养基中添加5ml~070血琼脂平板，用于细菌培养或溶血试验

亚铋琼脂平板(9cm) 10个/包 用于沙门氏菌的选择性分离

液体培养基250g用于甲烷菌计数培养

新生牛血清 采集自出生20天内的新生牛 新西兰 16010-159 500ml incubation media 新生牛血清 采集自出生20天内的新生牛 新西兰 16010-159 500ml

泾阳链霉菌 食用 支/瓶

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)平板9cm*用于测定酵母菌总数

LactoseBroth

Iron琼脂250g用于产

28982 技术琼脂粉(进口) BR 500g 培养基凝固剂，透明度高，凝固温度为35℃ incubation media 28982 技术琼脂粉(进口) BR 500g 培养基凝固剂，透明度高，凝固温度为35℃

谷氨酸棒杆菌 模式菌株 支/瓶

LBAgar

察氏液体培养基 250g 用于测定真菌孢子发芽率

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次供应JM培养基基础250g海博新产品

DPBS，(1X)(IVD) 含钙镁离子，不含酚红 14040-141 100ml incubation media DPBS，(1X)(IVD) 含钙镁离子，不含酚红 14040-141 100ml

灰树花 支/瓶

Baird-ParkerAgarBase

WLD培养基 250g 用于酿造和工业发酵过程中细菌分离培养