一站式平末端克隆试剂盒20 次规格

一站式平末端克隆试剂盒20 次规格详细介绍：

产品及特点：
一站式平末端克隆试剂盒20 次规格本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
规格及成分：

使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

小鼠间充质干细胞(EGFP标记) Mouse

CM-M121小鼠角膜内皮细胞完全培养基100mL

成人心房成纤维细胞 (HCFaa)( 5×105 )

野生型人c-kit受体细胞株;A7d 小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL

杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12

CD300C Others Human 人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

人虹状体上皮细胞 (HIPEpiC)( 5×105 )

CM-M035小鼠肝动脉平滑肌细胞完全培养基100mL

小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6 小鼠腮腺细胞完全培养基 100mL

小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse

FOLR1 Others Human 人 FOLR1 / Folate receptor alpha 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

DDC Others Human 人 DOPA Decarboxylase / DDC 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母细胞)5×106cells/瓶×2

人细胞裂解物HHDPCL

EB-3[EB3]细胞，人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞 人肾透明细胞腺癌细胞,786-O细胞 前脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

兔间变表皮鳞癌瘤株;VX2

SPINT2 Others Mouse 小鼠 SPINT2 / HAI2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母细胞)5×106cells/瓶×2

DDC Others Human 人 DOPA Decarboxylase / DDC 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

人细胞裂解物HHDPCL

EB-3[EB3]细胞，人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞 人肾透明细胞腺癌细胞,786-O细胞 前脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

兔间变表皮鳞癌瘤株;VX2

SPINT2 Others Mouse 小鼠 SPINT2 / HAI2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

M-Broth

BG11Medium

改良Giolitti-Cantobi 肉汤 Modified Giolitti-Cantoni Broth 250 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养

22体培养基250g/瓶用于海生细菌的增菌培养incubationmedia22体培养基250g/瓶用于海生细菌的增菌培养

SalmonellaShigellaAgar

一次性卫生用品检验检验培养基

改良Y培养基 Agar Y，Modified 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌

抗生素7号培养基 Antibiotic Agar NO.7 250克 噻圬钠等的效价测定

SD-39琼脂250用于滤膜法大肠杆菌0离培养(NEOGEN方法)incubationmediaSD-39琼脂250用于滤膜法大肠杆菌0离培养(NEOGEN方法)

Enterotoxintoxin-producingmedium

ATCC培养基：2693改良Dixon(mDixon)250g用于真菌培养

25L incubation media 25L

梨形霉 产淀粉酶 支/瓶

煌绿乳糖胆盐肉汤BGLB(含小倒管)20支/包用于大肠菌、大肠杆菌的测定

CandidaChromogenicMedium

一站式平末端克隆试剂盒20 次规格YeastExtractPeptone

Preston肉汤基础 250(g) incubation media Preston肉汤基础 250(g)

大肠杆菌O157显色培养基配套平皿 O157 Chromogenic Medium Dish 9㎝/块

APT琼脂250用于乳酸菌分离培养incubationmediaAPT琼脂250用于乳酸菌分离培养

四环素检定、厌氧亚盐还原杆菌、嗜热菌芽孢检验培养基