一站式平末端克隆试剂盒20 次规格_详细资料

产品信息

货号： BJ-RD781 保存条件：低温冷藏供应商：上海邦景保质期：详见说明书 CAS号：详见说明书英文名：一站式平末端克隆试剂盒数量： 20 规格： 20 次

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一站式平末端克隆试剂盒20 次规格详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是一站式平末端克隆试剂盒20 次规格的相关产品：
Simvastatin(HMG-CoA Reductase YZ剂 )10mg 96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S YZ剂 )50mg 96 孔板血液 DNAout( 离心法 )1次
SMT(iNOS YZ剂 )100mg 96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1次
SNP(NO 供体 )1g 96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )5次
SOD( 抗氧化酶 )65KU 96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )1次
天净沙核酸浓缩剂30mL 免质粒提取筛选试剂盒1000 次
柱式 RNA 纯化试剂盒50 次免疫蛋白清除剂20 次
低载量 PCR 片段纯化试剂盒50 次免 RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 100 次
低载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒30 次
高载量 PCR 片段纯化试剂盒50 次免 DNA 提取 PCR 试剂盒100 次
内毒素清除专用亲和介质50mL 填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5次
终点显色法内毒素定量试剂盒32 次甜菜碱溶液，5M，PCR 级1.5mL
动态显色法内毒素定量试剂盒48 次天然蛋白 A1mg
动态浊度法内毒素定量试剂盒1.7mL×10 支天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次
凝胶法内毒素半定量试剂盒10x0.1mL 天净沙镍柱原位再生试剂盒20 次
苍白芽孢杆菌   阿尔莱特葡萄球菌
匍匐放射毛霉或雅致放线毛霉   台湾根霉
嗜热脂肪芽孢杆菌冻干粉   银耳、白木耳食用
溶酪葡萄球菌   金耳、黄木耳食用
敏捷食酸菌   具核梭杆菌多形亚种
发酵性酵母   苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki
痢疾志贺菌冻干粉   蔗糖发酵管5ml 30 支/盒
成团肠杆菌(成团泛菌)   长根菇
威尼斯不动杆菌   副球菌
真线侧耳短孢变种   金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae
一站式平末端克隆试剂盒20 次规格猴头菌   健强地霉
淡紫色拟青霉   抗辐射不动杆菌
硫乙醇酸盐平板培养基90mm   大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 带有YCplac111穿梭质粒
白色噬琼胶菌   大肠埃希氏菌(大肠杆菌) YIplac128穿梭质粒
变绿粘球菌   大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 测定维生素B12
操作步骤:
1. 一站式平末端克隆试剂盒20 次规格匀浆处理:a.组织将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在Z适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全YZRNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。细菌的培养和收集将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要

温馨提示：不可用于临床ZL。

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