LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL供应详细介绍:

产品及特点:
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL供应本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL供应规格及成分:

LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL供应使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
HCT-8/FU 人结肠癌尿耐药株
CL-0059CFPAC-1(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 )
小鼠畸胎瘤细胞;P19 小鼠肺血管内皮细胞完全培养基 100mL
ZG仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人癌细胞;MDA-MB-453
人淋巴内皮细胞 (HLEC)( 5×105 )
CL-0431RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人癌细胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隐静脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
AtT20 小鼠垂体瘤细胞
VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
MBL2 Others Human 人 MBL2 / MBL / COLEC1 CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2
人神经细胞裂解物HNL
牛肾细胞;MDBK 人咽鳞癌细胞,FaDu细胞 Nb2-11细胞,小鼠淋巴瘤细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM932
THSD1 Others Mouse 小鼠 THSD1 / TMTSP 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2
MBL2 Others Human 人 MBL2 / MBL / COLEC1 CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人神经细胞裂解物HNL
牛肾细胞;MDBK 人咽鳞癌细胞,FaDu细胞 Nb2-11细胞,小鼠淋巴瘤细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM932
THSD1 Others Mouse 小鼠 THSD1 / TMTSP 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
BPLAgar
MZACAgar
哥伦比亚MUG培养基 Columbia- MUG Medium 250 用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)
蛋白胨-盐溶液250g/瓶用于样品的稀释(NY)incubationmedia蛋白胨-盐溶液250g/瓶用于样品的稀释(NY)
营养琼脂平板(9cm) 10个/包 细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用
胰蛋白胨大豆琼脂培养基28072250g用于普通的或营养要求较高的细菌的培养,还用于医药工业洁净室无菌程度的监测及消毒剂消毒效果的...
BiGGY 琼脂 (Nickerson 培养基) (CM0589) Oxoid incubation media BiGGY 琼脂 (Nickerson 培养基) (CM0589) Oxoid
藤黄八叠球菌 支/瓶
TryptoneBileAgar
BloodEnrichmentMedium
改良CCD琼脂基础27382250g用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每基础培养基需添加剂
2321-prf FM-acf-prf 成纤维细胞培养基 500 ml incubation media 2321-prf FM-acf-prf 成纤维细胞培养基 500 ml
硫乙醇酸盐流体培养基 300ml/袋*10 用于药品,生物制品无菌试验,用于需氧菌、厌氧菌的培养
脑心浸液琼脂(BHIA)250g用于营养苛求细菌的增菌培养
C.L.E.DMediumSupplement
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL供应NTMMedium
50070 酵母浸膏 BR 500g 培养基原材料,含有丰富的B族维生素、氨基酸 incubation media 50070 酵母浸膏 BR 500g 培养基原材料,含有丰富的B族维生素、氨基酸
浮游球衣菌 食用 支/瓶
AmiesTransportMedium
YMMedium