高通量细胞成像微孔板检测仪,细胞成像微孔板检测仪
。DIMSCAN利用FDA染料在活细胞内聚集的特性结合半自动数字影像荧光显微镜定量,依据减去背景后的FDA荧光强度来定量存活细胞相对数量,在4个对数级范围内提供存活细胞与荧光强度良好的线性关系,与MTS的2个对数级检测范围相比,具有更高的敏感性。
DIMSCAN是首先在洛杉矶儿童医院的细胞学实验室开发,由于其优异的灵敏度和体外微孔细胞毒性试验可达到>4 logs的线性关系,所以一经推出,就得到了世界的认可。由于DIMSCAN测量细胞数量上下限可以在10000倍以上(比如Z小可以检测10个细胞, Z大则可以测量10万个细胞以上),DIMSCAN系统对存活细胞定量观察线性回归达到了惊人的R2= 0.99967 ± 0.0003 ,所以非常宽的动态范围以及高JZ的敏感度给予了DIMSCAN在细胞毒理学研究、药理学研究和细胞生物学研究较高的应用价值。该系统已被证明是对各种细胞类型,包括正常的淋巴细胞、白血病细胞系、各种实体肿瘤细胞,或者对贴壁以及悬浮培养细胞都可以应用。
用DIMSCAN测定系统测定细胞毒性,此系统使用数字成像显微镜测定6至384孔培养板每孔中计数活细胞的个数,活细胞选择性地积聚荧光黄二醋酸盐变成亮色的荧光。此系统能通过用曙红Y淬灭已死亡或濒临死亡的细胞的残存荧光,并用数字阈测定活细胞的总荧光,而在4-5个数量级动态范围内4到7天测定细胞毒性。所测定的荧光与活细胞数量成正比。将经药物ZL的细胞群体的总荧光和相似数量的未经ZL的细胞的荧光对比,得出存活率。
2、系统亮点概述
DIMSCAN是用于在组织培养板中定量的相对细胞数半自动数字图像显微术系统。使用荧光素二乙酸酯(FDA)通过DIMSCAN测定细胞毒性测定法中,染料在活细胞选择性地累积,利用集落形成测定法,可以实现动态范围在4至7天内的生长曲线。
(1)活细胞的相对数目是通过测算荧光素二乙酸酯(FDA)的荧光强度,削减由背景荧光的阈值和由曙红所终止的不可存活的细胞的荧光值进行测量。
(2)可以使用6至384个孔的矩形培养板,对于96孔板平均扫描时间为6分钟。
(3)系统采用了基于自相关函数的自动聚焦功能以Z大限度地提高了系统的自动化的程度。
(4)相关程序存储重新扫描过程中的图像,并在用户扫描结束时显示出来,至今进行新的扫描过程。
(5)具有操作简便、准确、灵敏、重复性好等优点,细胞数量在1, 10, 20, 50, 100, 200, 500, 1000, 2000, 5000和10000 每个培养孔,测量8个重复,细胞数量与荧光强度呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9996746375