人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称 人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:10~1:20传代,每2~3天换液1次。
传代情况 P20
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
ABHD4 英文名称: α/β水解酶4抗体 0.2ml
ADCK2 英文名称: ADCK2蛋白抗体 0.2ml
ALDH16A1 英文名称: 乙醛脱氢酶16家庭A1抗体 0.2ml
AMIGO3 英文名称: 粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体 0.2ml
AKR1A1 英文名称: 乙醇脱氢酶1抗体 0.2ml
ALAD 英文名称: δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体 0.2ml
ALS2CR4 英文名称: 肌萎缩侧索硬化症相关蛋白4抗体 0.2ml
alpha 2 Macroglobulin 英文名称: α2巨球蛋白(α-2M)抗体 0.2ml
ACCSL 英文名称: ACCSL蛋白抗体 0.2ml
AFP 英文名称: 甲胎蛋白抗体 0.1ml
Mint3 英文名称: β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体 0.2ml
ASTN2 英文名称: 星形肌动蛋白抗体 0.2ml
TREX1 英文名称: 系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体 0.2ml
phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 英文名称: 磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体 0.1ml
Phospho-ATRIP (Ser224) 英文名称: 磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体 0.1ml
AP2M1 英文名称: 接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体 0.2ml
Phospho-AP2M1 (Thr156) 英文名称: 磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体 0.1ml
Annexin A7 英文名称: 膜粘连蛋白7抗体 0.1ml
C3orf15 英文名称: 3号染色体开放阅读框15抗体 0.2ml
APOB48R 英文名称: 载脂蛋白B受体抗体 0.2ml
ABCA2 英文名称: 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体 0.2ml
ApoB 英文名称: 载脂蛋白B抗体 0.1ml
ALOX15B 英文名称: 花生四烯酸15脂氧合酶2抗体 0.2ml
APOC4 英文名称: 载脂蛋白C4抗体 0.2ml
ARH 英文名称: 低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体 0.2ml人肝窦内皮细胞完全培养基 100mL
人胃粘膜上皮细胞完全培养基 100mL
人直肠平滑肌细胞完全培养基 100mL
人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL
人胎盘滋养层细胞完全培养基 100mL
人胎盘绒毛膜细胞完全培养基 100mL
人子宫平滑肌细胞完全培养基 100mL
人子宫成纤维细胞完全培养基 100mL
人卵巢上皮细胞完全培养基 100mL
人卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL
人卵巢微血管内皮细胞完全培养基 100mL
人子宫内膜上皮细胞完全培养基 100mL
人子宫颈上皮细胞完全培养基 100mL
人支持细胞完全培养基 100mL
人肾小球内皮细胞完全培养基 100mL
人肾管状上皮细胞完全培养基 100mL
人肾皮层上皮细胞完全培养基 100mL
人肾上皮细胞完全培养基 100mL
人胚肾细胞;293 [HEK-293]说明书人输尿管上皮细胞完全培养基 100mL
人肾实质细胞完全培养基 100mL
人肾系膜细胞完全培养基 100mL
人膀胱上皮细胞完全培养基 100mL
人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL
人肾动脉内皮细胞完全培养基 100mL
人肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
人肾成纤维细胞完全培养基 100mL