【名称】:人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒
【规格】:48T/96T
【方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【性状】: 液态
【Elisa试剂盒种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
【用途】:科研 实验
【贮存】: 贮存于2℃-8℃.如有需要,我们将竭城为顾客提供售前,售中,售后的全方位服务!
试剂的准备之显色
显色是 ELISA 中的Z后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间,及时判断。
OPD 底物显色一般在室外温或37℃反应20-30 分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值ZG。OPD 底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD 产物用硫酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。
TMB 受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。T MB 经HRP 作用后,约40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶YZ剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
保存: 贮藏于2-8°C。
标本收集
1. 本试剂盒可使用血清、血浆、细胞培养上清液、组织液标本。
2. 室温(20-25℃)下保存标本不要超过8小时。2-10℃保存标本,不超过48小时。如耽搁的时间更长,请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融,这样可能会损失蛋白活性,产生错误结果。
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒操作步骤
试剂盒应平衡至室温(20-25°C )再试验。 取出所需反应板。
1. 加入10ul标准品(Standards)、10ul标本于相应反应板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。轻轻混匀30秒,封住板孔,室温温育 45分钟。
3. 洗板:甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350ul洗涤液),并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);反复洗涤5次。
4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温温育20分钟。
5. 每孔加入100ul终止液(Stop Solution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。
以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒高质量的货物运输保证
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