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人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒 ,英文名称:Human E-Selectin,E-Sel ELISA Kit
北京 人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒,人E选择素Elisa试剂盒 厂家 【原理介绍】
E-Selectin, E选择素,选择素家族一员,是一种分子量107-115KDa的细胞表面糖蛋白。E选择素配体在中性粒细胞、单核细胞、部分记忆T细胞上表达。E选择素/E选择素配体在炎症时使中性粒细胞吸附至血管壁,并沿血管壁移动。此初始反应引起ICAM-1,VCAM-1更强烈的反应,使炎症细胞进入血管外间质。
北京 人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒,人E选择素Elisa试剂盒 厂家 试剂盒组成

北京 人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒,人E选择素Elisa试剂盒 厂家 标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
北京 人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒,人E选择素Elisa试剂盒 厂家 操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。



2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
北京 人E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒,人E选择素Elisa试剂盒 厂家 ELISA结果判定常用的几种方法
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,实验结果判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。