H5亚型禽流感病毒IgG抗体检测试剂盒

H5亚型禽流感病毒IgG抗体检测试剂盒说明书
【】
禽流感（Avian influenza，AI）是目前危害国内养禽业的一种急性接触性病毒性传染病。疫苗免疫是预防和控制禽流感发生的有效途径，而免疫后抗体水平的高低反映实际的疫苗免疫效果，直接关系到免疫鸡群对禽流感病毒的抵抗力。
在种鸡预防免疫工作中,值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。在两次免疫的间隔时间里,种鸡的抗体水平会随着时间逐渐下降,而在何种水平进行强化免疫是一个令人头疼的问题。因为在过高的抗体水平进行免疫,不仅浪费疫苗,增加了经济成本,而且过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败；但是在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁种鸡的健康。
本产品适用于不同品种、不同日龄鸡的血清中禽流感病毒特异性抗体的检测。可用于禽流感（全病毒）疫苗免疫效果评价、免疫时间的确定分析、地区鸡群禽流感免疫状况评价等。
【原    理】
本品系由包被H5亚型禽流感病毒重组抗原的微孔板和酶标记抗鸡IgG及其他试剂组成，应用酶免间接法原理（ELISA）检测鸡血清或血浆中H5亚型禽流感病毒 IgG抗体。
【试剂盒组成】 

1.	禽流感H5亚型病毒抗原包被微孔板条	96T×1
2.	酶标记物	11ml×1
3.	样品稀释液	20ml×2
4.	显色剂A	7 ml×1
5.	显色剂B	7 ml×1
6.	洗涤液（用前1：25稀释）	10 ml×2
7.	抗体阳性对照血清	0.7 ml×1
8.	抗体阴性对照血清	0.7 ml×1
9.	终止液	7 ml×1
10.	封板膜	3
11.	密封袋	1个
12.	说明书	1份

【使用方法】
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl；用样品稀释液以100倍的比例分别稀释要检测的血清样品，稀释后每孔加100μl；空白对照孔不加。
4. 混匀，置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤，同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
10.  每孔加终止液50μl，混匀，置酶标仪450nm处测各孔A值（建议用双波长450nm、630nm）。
【结果判定】
1. 阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.1；
2. 阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.5；
3. 结果判定：
   检测标本A450值≥0.35即血凝滴度≥6log2时有很好的保护；
0.4＞A450≥0.3相应血凝滴度为6log2，有一定保护力
当A450≤0.3时建议加强免疫（10个血凝效价时A450在1.0左右）
【注意事项】
1. 操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
2. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
3. 样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
4. 洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
5. 所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6. 微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可，未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。
7. 用于检测的样品应保持新鲜。
8. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
9. 不同批号试剂组分不得混用。
【保存与有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。