REPOTMRBP-JK慢病毒报告基因主要用于检测细胞中Notch信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMLVRBP-JK-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个RBP-JK结合位点,可以高灵敏度地检测RBP-JK的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞,比如原代细胞,干细胞,神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内,实现稳定转染。
质粒图谱:
质粒元件信息:
5'LTR | 1-635 |
PBS (primer binding site) | 636-653 |
Ψ (packaging signal) | 685-822 |
RRE (Rev-response element) | 1303-1536 |
cPPT (central polypurine tract) | 2028-2151 |
RBP-JKresponse element | 2191-2230 |
Luciferase | 2296-3948 |
PPGK(phosphoglycerate kinase promoter) | 3978-4486 |
Puror (puromycin resistance gene) | 4507-5106 |
WPRE(woodchuck posttranscriptional regulatory element) | 5120-5711 |
3'LTR | 5914-6550 |
PUC origin of replication | 7693-7020 |
Ampr | 8834-7838 |
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
GM-022009 | REPOTMRBP-JK慢病毒报告基因 | 50ul×4管;1×10e7TU/ml |
- | 说明书 | - |
使用说明:
RBP-JK报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项:
1. 病毒操作时Z好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。
2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。
3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。
5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
保存条件:
-80℃保存。(如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度)
参考文献:
[1] Hahm ER, Chandra-Kuntal K, Desai D, Amin S, Singh SV.
Notch activation is dispensable for D, L-sulforaphane-mediated inhibition of human prostate cancer cell migration.
PLoS One. 2012;7(9):e44957. doi: 10.1371/journal.pone.0044957. Epub 2012 Sep 7.
[2] Lee J, Sehrawat A, Singh SV.
Withaferin A causes activation of Notch2 and Notch4 in human breast cancer cells.
Breast Cancer Res Treat. 2012 Nov;136(1):45-56. doi: 10.1007/s10549-012-2239-6. Epub 2012 Sep 11.
[3] Kim SH, Sehrawat A, Singh SV.
Notch2 activation by benzyl isothiocyanate impedes its inhibitory effect on breast cancer cell migration.
Breast Cancer Res Treat. 2012 Aug;134(3):1067-79. doi: 10.1007/s10549-012-2043-3. Epub 2012 Apr 4.
[4] Guo S, Gonzalez-Perez RR.
Notch, IL-1 and leptin crosstalk outcome (NILCO) is critical for leptin-induced proliferation, migration and VEGF/VEGFR-2 expression in breast cancer.
PLoS One. 2011;6(6):e21467. doi: 10.1371/journal.pone.0021467. Epub 2011 Jun 23.
产品价格:
货号 | 名称 | 产地 | 规格 | 报价/元 |
GM-022009 | Lentivirus RBP-JK luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 | Genomeditech | 50ul×4管; 1×10e7TU/ml | 3200 |