NHS21-5 高GC纳米PCR试剂盒

高GC纳米PCR试剂盒选上海户实

产品目录号：NHS21-5

高GC纳米PCR试剂盒产品说明：本试剂盒既适用于高GC序列的扩增，也适用于一般PCR扩增。产品定位于解决目前市场上难于扩增的若干PCR反应。纳米PCR是纳米材料辅助的基因扩增技术,研究表明某些纳米材料可以增强基因扩增的总体效率。

高GC纳米PCR试剂盒12ul/160次   配置如下：

2×NanoPCR buffer 11-1 (1000ul)；

2×NanoPCR buffer 11-2 (1000ul)；

2×NanoPCR buffer 11-3 (1000ul)；

dNTPs (2.5mM)(300ul)；

MgCl₂ (25 mM) (500ul)；

Taq DNA polymerase (5 U/ul) (60ul)

使用建议:

• 纳米材料容易聚集，每次使用前请震荡均匀再使用。PCR产物中含有的纳米材料一般不影响电泳等后续操作。
• 一个典型的PCR反应（举例：扩增一个高GC片段780bp）设计如下：

PCR程序举例：[94℃-5min]；[94℃-30s，56℃-30s，72℃-40s]×35 cycles（循环数可按照PCR产物的多少适当调节）；[72℃-5min]. 如果不确定Z佳退火温度，可以先做梯度PCR确定Z佳退火温度。

• 批量PCR需要计算并规划好实验中所需要混合的mix总量以及需要单独加入PCR体系中的成分和加量。例：做以不同基因组为模板的9管12ul体系的PCR。计入加样损耗，按10管加量计算。试验操作全过程建议在冰盒上进行。

按照上表所描述的将mix做好，并反复摇晃15-20下、上下振荡后离心（大约待离心机转到7000rpm随即停下来就好），离心后，用枪头分别加入相应基因组0.2ul的PCR管内，每管11.8ul并用枪头顺便混合3下使均匀。放入PCR仪进行PCR。

实验举例1：扩增以人类基因组为模板的38对序列引物。该38对高GC扩增产物GC>60%,大小均在700-800bp左右。38对退火温度基本一致。使用上述12ul扩增体系， 使用NanoPCR试剂盒进行扩增的图片如图1所示。

图1 使用NanoPCR试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片

Marker为λ/Hind Ⅲ.

图2 使用国外某公司高GC试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片

图3  使用国内某公司高GC试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片

保存温度：-20℃

保质期：12个月