品牌
SOLARBIO/索莱宝
货号
BC1230
规格
50管/48样
供货周期
现货
主要用途
抗坏血酸(AsA)含量测试
应用领域
医疗/卫生,化学品检测,生物产业,石油/化工
抗坏血酸(AsA)含量测试盒 维生素C代谢
产品简介:
抗坏血酸(AsA)又称维生素c,是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体以及草酸盐和酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中重要的抗氧化剂,抗坏血酸在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用,也是衡量农作物产品品质的重要指标之一。
抗坏血酸氧化酶(AAO)能将AsA 氧化成DHA,通过测定AsA的氧化速率,即可计算出AsA含量。
试验中所需的仪器和试剂:
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、蒸馏水
产品内容:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体×1瓶,4℃保存。临用前加入5mL试剂二,混匀;
标准品:粉剂×1瓶(棕色),4℃保存。临用前配置,加入5.679mL蒸馏水充分溶解;吸取0.1mL上述溶液,加入0.9mL蒸馏水,混匀,即100μmol/L AsA。
操作步骤:
一、AsA提取 :
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心20min,取上清置冰上待测。。
二、测定操作:
- 分光光度计预热30min,调节波长到265nm,蒸馏水调零。
- 试剂二在25℃水浴锅中预热30min以上。
- 标准管:依次在比色皿中加入100μL 标准液、800μL试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm测定,记录30s和150s的吸光值A1和A2。△A标准管= A1- A2。
- 测定管:依次在比色皿中加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于265nm测定,记录30s和150s的吸光值A3和A4。△A测定管= A3- A4。
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AsA含量计算:
(1)按蛋白浓度计算:
AsA(μmol / mg prot) = (C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准)÷(Cpr×V样)
=0.1×△A测定管÷△A标准管÷Cpr
(2)按样本质量计算:
AsA(μmol /g mass) = (C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准)÷(W×V样÷V样总)
=0.1×△A测定管÷△A标准管÷W
C标准液: 100μmol/L;V标准:标准液体积,0.1mL;V样总:上清液总体积,1.0mL=0.001L;V样:加入反应体系中上清液体积,0.1mL ;W:样品质量,g。
相关文献:
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji, Panpan Zhang, Yixiao Xing, Linglu Jia, Yunpeng Zhang, Tingting Jia, Xuan Wu, Bin Zhao, Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365053
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