传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到人皮肤癌细胞系 HS-1细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤人皮肤癌细胞系 HS-1细胞,不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
传代 ,复苏,冻存,
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
3. 离心, 1 000 rpm,5 min。
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以Z大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
xy-7856R ALOXE3表皮型脂氧合酶3抗体(鱼鳞病相关蛋白)
xy-7926R ANKRD28锚蛋白重复域28抗体
xy-7886R AFF4淋巴细胞相关AF4样蛋白抗体
xy-7962R ANKRD12锚蛋白重复结构域蛋白12抗体
xy-7963R ANKRD13A锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体
xy-7964R ANKRD9锚蛋白重复结构域蛋白9抗体
xy-7966R ANKS1A锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体
xy-7965R APM2脂肪特定转录因子2抗体
xy-7967R APOL3载脂蛋白L3抗体
xy-7969R ARMC3 (Cancer/testis antigen 81)肿瘤/睾丸抗原81抗体
xy-9304R ARL8BADP核糖基化样因子8B抗体
xy-9110R ATAD2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体
xy-9081R AKIRIN1AKIRIN1蛋白抗体
xy-9325R ASZ1锚定蛋白样蛋白1抗体
xy-6875R Adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗体
xy-5151R Acrosin精子顶体前体蛋白抗体
xy-9093R AIM1L黑色素瘤缺失样蛋白1抗体
xy-9096R AER61未知糖基化转移酶AER61抗体
xy-0110R FE65铁蛋白Fe65抗体
xy-2903R ARHI抑癌基因ras同源家族1抗体
xy-3569R AP2 alpha转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体
xy-2040R ANP心钠素抗体
xy-1603R AARS2丙氨酰tRNA合成酶2抗体
xy-1381R AKAP12丝氨酸YZ蛋白激酶C底物抗体
xy-0968R Alpha-Synuclein核突触蛋白α抗体
xy-1384R APG4B自噬相关蛋白4B抗体
xy-1385R ADAMTS12整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体
xy-1741R alpha Actinin 4-Loading Controlα-辅肌动蛋白4(内参)抗体
xy-1535R Alkaline Phosphatase碱性磷酸酶抗体
xy-2114R AU1 tagAU1 tag标签抗体
xy-0322R AEBP1脂肪细胞增强结合蛋白1
xy-0115M AKT1蛋白激酶B
xy-0115R AKT1蛋白激酶B
xy-0537R ANGL2血管生成素样蛋白2抗体
xy-1087R Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗体
xy-1171R Annexin I膜粘连蛋白 I抗体
xy-0576R Annexin A2膜粘连蛋白 Ⅱ抗体
xy-0517R ATF1活化转录因子1抗体