传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到人皮肤癌细胞系 HS-4细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤人皮肤癌细胞系 HS-4细胞,不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
传代 ,复苏,冻存,
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
3. 离心, 1 000 rpm,5 min。
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以Z大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。xy-3871R ATG18自噬相关蛋白18抗体
xy-3873R ATG4A自噬相关蛋白4A抗体
xy-3876R APOA4载脂蛋白A4抗体
xy-3874R ALOX1212脂氧合酶抗体
xy-3877R Angiotensin III血管紧张素III抗体
xy-4021R ADCY3腺苷酸环化酶3抗体
xy-4171R Angiomotin血管动蛋白抗体
xy-6136R Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗体
xy-5170R phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化复制因子2抗体
xy-5171R phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化复制因子2抗体
xy-5213R phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失调症蛋白1抗体
xy-9295R ANKRD17锚蛋白重复结构域蛋白17抗体
xy-6509R ALDH1A1胞质乙醛脱氢酶1抗体
xy-6162R ARL3ADP核糖基化样因子ARL3抗体
xy-6505R 15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗体
xy-6515R ABC2乳腺癌增强蛋白2抗体
xy-6512R Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗体
xy-4651R Alpha B Crystallinα晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体
xy-5900R ADORA2B腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体
xy-6251R ARKMPK的相关蛋白激酶5抗体
xy-5927R ANP32C致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体
xy-6654R Adenosine deaminase腺苷脱氨酶抗体
xy-9130R ASB4含锚蛋白重复序列-细胞因子信号YZ物盒蛋白家族4抗体
xy-11504R ATRNL1ATRNL1蛋白抗体
xy-10081R AFP4aAFP4a蛋白抗体
xy-11627R APBB2铁蛋白Fe65样蛋白1抗体
xy-11637R APBB3铁蛋白Fe65样蛋白2抗体
xy-11639R APPBP2β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体
xy-11640R Aph-1b早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体
xy-10133R phospho-AKT1 (Tyr474)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
xy-10134R phospho-AKT1 (Ser473 + Tyr474)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
xy-11866R ASH1LASH1L蛋白抗体
xy-12040R ADRA2Cα2C-AR肾上腺素能受体抗体
xy-12977R AZI1ZX体蛋白AZI1抗体
xy-7857R ALPK3α蛋白激酶3抗体(心肌)