小鼠黑色素瘤高转移细胞,B16F10细胞增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行。
货号:XY0213 规格:1×
/管 培养基:RPMI1640+10%FBS 运输:干冰运输
保存:液氮保存
小鼠黑色素瘤高转移细胞,B16F10细胞质量控制:
本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。
培养条件:
37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,无菌恒温培养。
用途:
本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于ZL等其他方面。
细胞相关操作:
复苏
1.37°C水浴预热培养基(RPMI1640+10% FBS);
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
细胞传代
1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;
2.37°C水浴预热培养基(RPMI1640+10% FBS);
3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞;
4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基(RPMI1640+10% FBS)终止消化;
5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min;
7.弃上清,加入15-20ml的培养基(含血清)重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养。
细胞冻存
1.37°C水浴预热培养基(RPMI1640+10% FBS);
2.消化细胞后给细胞计数:
1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片完全覆盖计数区;
2)充分混匀细胞,取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳;
3)显微镜下,数四个计数区的总细胞数,无活性细胞染成蓝色,活细胞不被染色;
4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2;
这里10000是不变的,因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3计数池内,1cm3=1ml,将四个计数区的细胞数除以4取平均数,乘2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。
5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×。
注:细胞密度高时,可调整细胞悬液和台盼蓝的比例,计数时乘以相应的稀释倍数即可。
3.当细胞密度达到传代密度且细胞活性在90%以上时,可以冻存细胞。
4.在超净台中将要冻存的细胞移入离心管,1000rpm离心5min。
5.弃上清,用90%培养液+10%DMSO的混合液重悬细胞,并调整细胞密度为1-3×106/ml。
6.将细胞悬液分装到冻存管中(1-1.5ml/管)。
7.将装有细胞的冻存管放入程序降温冻存盒,-20°C放1-2h后,-80°C一晚,然后快速转移到液氮中。xy-9782R C1orf21号染色体开放阅读框2抗体
xy-9783R C1orf191号染色体开放阅读框19抗体
xy-9784R C1orf251号染色体开放阅读框25抗体
xy-9785R C1orf311号染色体开放阅读框31抗体
xy-9786R C1orf511号染色体开放阅读框51抗体
xy-9787R C1orf521号染色体开放阅读框52抗体
xy-9788R C1orf671号染色体开放阅读框67抗体
xy-9789R C1orf831号染色体开放阅读框83抗体
xy-6521R CRISP3富含半胱氨酸分泌蛋白3抗体
xy-6524R CT26肿瘤/睾丸抗原26抗体
xy-4270R CDKN2C细胞周期蛋白依赖性激酶YZ剂2C抗体
xy-4209R Cullin 2Cullin2抗体
xy-6225R CAMK1D钙调蛋白激酶CaMK1D抗体
xy-6621R CHX10CHX10蛋白抗体
xym-2141M CRIPTO畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体(C端)
xy-4269R CDKN2B细胞周期蛋白依赖性激酶YZ剂2B抗体
xym-2313M CRIPTO畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体
xy-4272R CHFR泛素连接酶蛋白CHFR抗体
xy-4208R Cullin 1Cullin1抗体
xy-6598R Cofilin肌动蛋白结合蛋白CFL抗体
xy-6580R CDMP1软骨衍生形态发生蛋白1抗体
xy-10032R Beta-caseinβ-酪蛋白抗体
xy-15121R c21orf63 21号染色体开放阅读框63抗体
xy-15196R C4orf524号染色体开放阅读框52抗体
xy-15193R C4orf404号染色体开放阅读框40抗体
xy-4211R Cullin 3Cullin3抗体
xy-4295R CDC40细胞分裂周期同源蛋白40抗体
xy-5711R CCDC106卷曲螺旋结构域蛋白106抗体
xy-4207R CHMP1A染色质修饰蛋白1A抗体
xy-4516R CPN10叶绿体伴侣蛋白抗体(苹果)
xy-7783R CDC20B细胞分裂周期蛋白20B抗体