小鼠黑色素瘤高转移细胞:B16F10细胞
BS-C00867611
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
RBSMC细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCRF-CEM [CCRF CEM]细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HepG2.2.15细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
MHCC97-H细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
MB-271细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CHO/dhFr细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MC53细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW 1353[SW 1353,SW-1353]细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠黑色素瘤高转移细胞:B16F10细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇ZT,并不是因为细胞消化Z重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
VMM39细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KOPN-8细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLMVEC细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LX2细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
小鼠黑色素瘤高转移细胞:B16F10细胞
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
COC1细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
U2OS细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RMD6细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HRCEpiC细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H647细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2次。
Anglne细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HEC-1B细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LS180细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2444细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2次。
LIXC-012细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BAr-T细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H1792细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
WEHI231细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PKN-012细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人夜盲蛋白(NYX)ELISA试剂盒,英文名:Human NYX ELISA Kit,规格:48T/96T
人基质抗原2(STAG2)ELISA试剂盒,英文名:Human STAG2 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒,英文名:Mouse INS ELISA Kit,规格:48T/96T
人锌指同源框蛋白4(ZFHX4)ELISA试剂盒,英文名:Human ZFHX4 ELISA Kit,规格:48T/96T
HSAS4细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U2OS细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠黑色素瘤高转移细胞:B16F10细胞
Hs 578Bst细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠β细胞素(βTC)ELISA试剂盒,英文名:βTC ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠上皮性黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CDHE ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠多配体聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒,英文名:SDC1 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠8异前列腺素F2a(8isoPGF2a)ELISA试剂盒,英文名:8isoPGF2a ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠CD4+分子(CD4+)ELISA试剂盒,英文名:CD4+ ELISA Kit,规格:48T/96T
人YZ因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒,英文名:Human MPIF-1/CCL23 ELISA Kit,规格:48T/96T
人蛋白酶激活受体3(PAR3)ELISA试剂盒,英文名:Human PAR3 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠胃泌素释放肽(GRP)ELISA试剂盒,英文名:GRP ELISA Kit,规格:48T/96T
人肉瘤抗原1(SAGE1)ELISA试剂盒,英文名:Human SAGE1 ELISA Kit,规格:48T/96T
ZX体肌动蛋白γ1抗体(增强型PI3K蛋白),英文名称:Anti-Centaurin γ1
醛缩酶C抗体,英文名称:Anti-Aldolase C
FU-MMT-1细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
卷曲螺旋结构域蛋白50抗体,英文名称:Anti-CCDC50
抑癌基因ras同源家族1抗体,英文名称:Anti-ARHI
环指蛋白15抗体,英文名称:Anti-RNF15
凝血因子9抗体,英文名称:Anti-Factor IX
基质金属蛋白酶-10抗体,英文名称:Anti-MMP-10
脂氧素受体1抗体,英文名称:Anti-FPRL1/RFP/Lipoxin A4 receptor
NCI-H1694细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:聚团悬浮;细胞传代方法:3-4天换液1次。
MA-c细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CEM-T4细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MLFC细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MDCC-MSB-1细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒,英文名:Human HCBⅡ ELISA Kit,规格:48T/96T
人左右决定因子1(LEFTY1)ELISA试剂盒,英文名:Human LEFTY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人抗调素特异抗体(CAM-ab)ELISA试剂盒,英文名:Human CAM-ab ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠抗胃壁细胞抗体(AGPA)ELISA试剂盒,英文名:AGPA ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠类固醇5α还原酶1(SRD5α1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SRD5α1 ELISA Kit,规格:48T/96T
血小板源性生长因子受体B抗体(PDGFRβ),英文名称:Anti-PDGF Receptor beta/PDGFRB
抗药蛋白抗体,英文名称:Anti-SR1/Sorcin
Ets转录因子家族ets1抗体,英文名称:Anti-Ets1/ETS-1
鸟嘌呤核苷酸交换因子rasgef1a抗体,英文名称:Anti-RASGEF1A
RPTC细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LS411N细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代;每周2次
小鼠黑色素瘤高转移细胞:B16F10细胞
U343细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
GC-1 spg细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人可溶性CD8(sCd8)ELISA试剂盒,英文名:Human sCd8 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠β细胞素(βTC)ELISA试剂盒,英文名:βTC ELISA Kit,规格:48T/96T
血管生成素-1抗体,英文名称:Anti-ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1
蛋白酶体激活因子PA28γ抗体,英文名称:Anti-PSME3/PA28 gamma
化核糖体S6蛋白激酶β2抗体,英文名称:Anti-Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389)
癌胚抗原相关细胞粘附分子16抗体,英文名称:Anti-CEACAM16/CEAL2
解旋酶DEAD5抗体,英文名称:Anti-DDX19B/DBP5
FL83B细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PSN1细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:6传代,2-3天换液1次。
OCI-AML3细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H4细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KARPAS-422细胞系专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCRF-CEM [CCRF CEM]细胞系专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
跨膜蛋白147抗体,英文名称:Anti-TMEM147
化FANCD2抗体,英文名称:Anti-phospho-FANCD2(Ser222)
人血红蛋白单克隆抗体,英文名称:Anti-hHb(H3)
胰岛素样生长因子1抗体,英文名称:Anti-IGF I
1号染色体开放阅读框163抗体,英文名称:Anti-C1orf163