5×Real-Time qPCR MasterMix(TaqMan探针法)

特别提示：包括5×Real-Time qPCR MasterMix(TaqMan探针法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：5×Real-Time qPCR MasterMix(TaqMan探针法)
英文名称：5×TaqMan qPCR MasterMix
产品货号：MT0018
产品规格：20μl×100次|20μl×500次

本品是采用TaqMan 探针法进行 Real-Time PCR的专用试剂，适合于 FAM/HEX/TET/JOE 等双标记探针（本品也适用于 Molecular Beacon 探针），其中 2×Hi TaqMan qPCR Mix 将化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶、反应Buffer、dNTP 染料等试剂预混在一起，是一种 2×浓度的单组分预混试剂，进行实验时，PCR 反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、探针、模板、水即可。

本品中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA 聚合酶，该酶在50℃以下无活性，只有95度条件下加热15分钟后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效YZ非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

本品配有单独的ROX内参染料，使得该试剂可应用于所有 RealTime PCR 机型，包括：ABI 7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)；LightCycler（Roche Diagnostics)； Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-TimePCR(Bio-Rad&MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。


图：应用本品进行TaqMan探针法检测 10～107 copy模板的扩增曲线和标准曲线。

特点：
1．热启动酶采用化学修饰，热启动；
2．单组份预混液，使用方便快捷；
3．高特异性，有效YZ非特异性扩增；
4．高灵敏度，可检测低丰度基因；
5．适用于所有实时定量PCR仪器。

产品组成：

包装	5×TaqMan qPCR Mix	50×ROX Reference Dye
100T×20μl	400μl	200μl
500T×20μl	1ml×2	200μl

储存：长期保存，请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。

使用方法：

1．根据PCR仪选择步骤A或B

A: 需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

加入物	加入量	终浓度
5×TaqMan qPCR Mix	4μl	1×
50×ROX Reference Dye	0.4μl	1×
PCR Forward Primer(10μM)	0.8μl	0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)	0.8μl	0.4μM
TaqMan Probe（10μM)	0.4μl	0.2μM
DNA 模板	0.5~2μl
ddH2O	Up to 20μl

B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler（Roche Diagnostics)；MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

加入物	加入量	终浓度
5×TaqMan qPCR Mix	4μl	1×
PCR Forward Primer(10μM)	0.8μl	0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)	0.8μl	0.4μM
TaqMan Probe（10μM)	0.4μl	0.2μM
DNA 模板	0.5~2μl
ddH2O	Up to 20μl

2．进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：

Stage 1:	95℃	15分钟*
Stage 2:	95℃	10s
	60℃	60s	35～40 cycles

注意：由于该酶为化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶，必须于95℃加热 15分钟 才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短或延长。

3．反应结束后确认 Real-Time PCR的扩增曲线和标准曲线。

我公司销售的5×Real-Time qPCR MasterMix(TaqMan探针法)，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。