特别提示:包括深加工食品DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:深加工食品DNA提取试剂盒
英文名称:DNA extraction kit from deep-processing food
产品货号:WH0022
产品规格:100次
本试剂盒是特别针对食品原料和深加工食品的DNA提取试剂盒,成功提取到大豆粒、大米粒、玉米粒、饼干、方便面、豆腐、豆腐干、腐乳、豆浆、番茄酱、薯条、薯片、小馒头、粉条等食品的基因组DNA。无需酚/氯fǎng抽提,使用安全快捷方便,可限度去除食品中的蛋白、脂类及其他有机化合物等杂质。使用本试剂盒提取的食品DNA可适用于各种检测,包括PCR、荧光定量PCR等转基因检测实验。本试剂盒提取的DNA可用于加工食品PCR转基因检测、加工食品荧光定量PCR转基因检测等下游应用。
产品特点:·专用性强:专为国家食品安全检测相关部门开发的加工食品DNA提取的专项产品。
·操作时间短:1h内即可获得高质量的加工食品DNA。
·无毒害:无需使用酚/氯fǎng等有害试剂,操作安全。
·纯度高:获得的DNA纯度高,可直接用于PCR、荧光定量PCR等转基因检测实验。
试剂盒组成: 组分 | 100T |
缓冲液GMO1 | 50ml |
缓冲液GMO2 | 20ml |
Proteinase K | 2×1ml |
洗脱缓冲液TE | 15ml |
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.酱油、番茄酱等样品应进行预处理,以达到好的提取效果。特殊样品请咨询本公司后进行提取。
2.如果缓冲液GMO1中出现沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。
3.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。
使用方法:针对酱油含有较多焦糖色素、番茄酱pH值过低等不利于DNA提取的特点,在正式进入试剂盒提取之前,应对提取样品进行预处理。
酱油样品预处理:取酱油30ml,加入60 ml无水乙醇混匀,置冰箱(-20℃)放置10min后,10000rpm离心10min。弃上清,在沉淀中加入30ml 0.1M Tris.Cl(pH8.0)溶液,用力摇匀,全部转移至100 ml烧杯中,于磁力搅拌器上搅拌2 h。分装至1.5 ml离心管中,12000rpm离心10min。弃上清,加入1.5 ml 0.1M Tris.Cl(pH8.0)溶液,涡旋振荡至块状打散,12000rpm离心10min。弃上清,沉淀中的焦糖色素及盐等小分子已全部去除,可直接用于DNA提取。
番茄酱样品预处理:取番茄酱液态加工样品1.5 ml于离心管中,10000rpm离心15 min。弃上清,用1 ml 0.1M Tris.Cl溶液洗涤样品3次,振荡混匀,10000rpm离心15 min。弃上清,留沉淀待用。
1.称取研碎的深加工食品100mg或上述预处理的样品,加500μl缓冲液GMO1和20 μl的Proteinase K (20 mg/ml),旋涡振荡1 min。
2.56℃孵育1h。孵育过程中每15 min振荡一次。
3.加入200 μl缓冲液GMO2,充分混匀,涡旋振荡1 min。室温静置10min。
4.12000rpm(~13400×g )离心5 min,将上清转移至新的离心管中。
5.向上清液中加入0.7倍体积的异bǐng醇,充分混匀。(例如500μl的水相溶液加350 μl异bǐng醇),12000rpm(~13400×g )离心3 min,弃上清,保留沉淀(此步沉淀可能看不见)。
注意:加异bǐng醇沉淀后,弃上清应小心,防止把DNA倒出。
6.可选步骤:在步骤5加异bǐng醇之前,向上清液中加入1 μl Carrier RNA(酱油、番茄酱必加),再加入异bǐng醇。(Carrier RNA目录号:RT416-02)
7.加入700 μl 70%乙醇,涡旋振荡5 sec,12000rpm(~13400×g )离心2 min,弃上清。
8.重复操作步骤7。
注意:弃上清应小心,防止把DNA倒出。
9.开盖倒置,室温5-10min,彻底晾干残余的乙醇。
注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(PCR、荧光定量PCR等)实验。
10.加入20-50 μl洗脱缓冲液TE,旋涡振荡1 min,得到DNA溶液。
DNA提取效果检测:
由于深加工食品中DNA含量非常低,普通琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计等方法都不能很准确的检测,一般用PCR或荧光定量PCR来检测DNA提取效果。
如采用我公司2×Taq PCR MasterMix (目录号:WH0073)进行DNA提取效果检测(Lectin基因、Zein基因、Patatin基因检测):
PCR反应体系的建立,20 μl体系如下:
加入物 | 加入量 |
2×Taq PCR MasterMix | 10μl |
引物-F(10μM) | 0.5μl |
引物-R(10μM) | 0.5μl |
模版 | 4μl |
ddH2O | 5μl |
反应条件:
结果检测:反应结束后取5-10 μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
我公司销售的
深加工食品DNA提取试剂盒北京供应商,食品原料DNA提取试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
温馨提示:不可用于临床ZL。