荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)

特别提示：包括荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)
英文名称：2×SYBR Green qPCR MasterMix
产品货号：MT0017
产品规格：1ml|1ml×5|100ml

本品是采用SYBR Green 嵌合荧光法进行 Real-Time PCR的专用试剂, 将化学修饰的热启动Taq DNA 聚合酶、反应Buffer、dNTP、SYBR Green染料等试剂预混在一起，是一种2X浓度的单组分预混试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、模板、水即可。

2×SYBR Green qPCR Mix中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA 聚合酶，该酶在50℃以下无活性，只有95℃条件下加热15分钟后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效YZ非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

本品配有单独的ROX内参染料，使得该试剂可应用于所有RealTime PCR 机型，包括：ABI 7000/7700/7900HT, 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)；LightCycler（Roche Diagnostics) ；Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad&MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。


图：A-C为使用SYBR Green法检测 10～107copy模板的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。D.重复性高，误差<±0.5Ct。

特点：
1．热启动酶采用化学修饰，热启动
2．单组份预混液，使用方便快捷
3．高特异性，有效YZ非特异性扩增
4．高灵敏度，可检测低丰度基因
5．适用于所有实时定量PCR仪器

产品组成：

包装	2×SYBR Green qPCR Mix	50×ROX Reference Dye
100T×20μl(MT0017A)	1ml	200μl
500T×20μl(MT0017B)	1ml×5	200μl
10000T×20μl（MT0017C	100ml	4ml

储存：请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。 注：长期-20℃保存可能会出现沉淀，室温融化后混合均匀，不影响试剂性能。

注意事项：
1．2×SYBR Green qPCR Mix于-20℃保存时容易形成沉淀，可用手轻握或室温放置一段时间后，颠倒混匀待其完全融解后使用。
2．本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃)，使用频率低时置于-20℃，反复冻融会使制品性能下降。
3．配制反应液时，注意避免强光照射，并于冰上操作。

使用方法：

1．根据PCR仪选择步骤A或B

A：需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

加入物	加入量	终浓度
2×SYBR Green qPCR Mix	10μl	1×
50×ROX Reference Dye	0.4μl	1×
PCR Forward Primer(10μM)	0.4~0.8μl	0.2~0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)	0.4~0.8μl	0.2~0.4μM
DNA 模板	0.5~2μl
ddH2O	Up to 20μl

B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler（Roche Diagnostics)；MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

加入物	加入量	终浓度
2×SYBR Green qPCR Mix	10μl	1×
PCR Forward Primer(10μM)	0.4~0.8μl	0.2~0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)	0.4~0.8μl	0.2~0.4μM
DNA 模板	0.5~2μl
ddH2O	Up to 20μl

2．进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：

Stage 1:	95℃	15分钟*
Stage 2:	95℃	10s
	60℃	30s	35~40 cycles
Stage 3:	Dissociation analysis

注意：由于该酶为化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，必须于 95℃加热15分钟 才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短时间。

3．反应结束后确认 Real-Time PCR的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。

我公司销售的荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。