特别提示:包括红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料)
英文名称:Nucleic Acid Red(2000X)
产品货号:YT015
产品规格:1ml|5ml
本品是一种优于溴化乙锭(EB)的核酸染料,用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色,可替代升级SYBR Green。本核酸红染料具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点,凝胶中的核酸在使用本产品染色后用适当紫外灯(300nm左右波长)检测呈现红色荧光,适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统。
本核酸红染料比EB和SYBR Green更安全。本核酸红染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明,本核酸红染料的诱变性远小于EB。EB在多种致突变测试中呈现很强的诱变性,而本核酸红染料仅仅在浓度高达20微克/毫升时,并在S9代谢活化时有非常微弱的诱变性。通常本核酸红染料在凝胶中的工作浓度约为2微克/毫升,大大低于可导致诱变的浓度。本核酸红染料和百奥莱博的另外一种安全型核酸染料核酸绿色染料(YT016),由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞,从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜,进入活细胞并染色DNA,并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。
本核酸红染料检测灵敏度高,对于小分子量核酸的染色效果好。本核酸红染料的检测灵敏度比EB高8-10倍,在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳,尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时,本核酸红染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高;与SYBR Gold不同的是,本核酸红染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸的染色效果差,而本核酸红染料对于小分子量核酸的染色效果很好,便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。推荐使用的本核酸红染料浓度,其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度,可以适当提高本核酸红染料的工作浓度。
本核酸红染料的稳定性好,染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差,这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本核酸红染料的稳定性很好,可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本核酸红染料的光稳定性良好,可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性,含本核酸红染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。
本核酸红染料可以使用和EB相同的检测体系。本核酸红染料和EB的激发光和发射光都非常接近,可以直接用本核酸红染料替换EB,而不必更换已有的凝胶观察、拍照或成像系统(约300nm激发)。本核酸红染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。
本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱
本品可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶,也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便,而后者灵敏度要更高一些。但由于本品本身已经非常灵敏,通常采用把本品直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊情况,如核酸样品量特别少的情况等,则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。
本品对于核酸的迁移率影响非常小,小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。通过凝胶回收试剂盒(YT010)或酚lǜ仿抽提,可以有效去除与DNA或RNA结合的红色染料,从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。
储存条件:室温,避光,有效期一年。
注意事项:
1.本产品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。
2.本品和EB一样,作为荧光染料均需避光保存,但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3.制备好的本品琼脂糖凝胶,在4℃避光条件下通常可以保存3-5天。
4.本品琼脂糖凝胶再次熔化使用时,为取得更好的观察效果,需要添加适量本品。
5.电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6.电泳后再使用本品染色的凝胶一般不需要脱色。如果发现背景太高,可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7.本品和核酸绿色染料(YT016)除了可以染色双链DNA外,也可染色单链DNA和RNA。本品对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。本品对单链核酸的染色灵敏度约为YT016的5倍。
8.如果使用聚丙xī酰胺凝胶,请使用浸泡染色法染胶,并延长染色时间至30分钟-1小时。
9.如果观察到条带弥散或者分离不理想,建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题,说明与染料无关,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
我公司销售的
红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料),质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
温馨提示:不可用于临床ZL。