特别提示:包括注射用腔肠素h在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:注射用腔肠素h
英文名称:Injectable h-Coelenterazine
产品货号:KM0096
产品规格:2×500μg|20×500μg
腔肠素h是天然腔肠素的脱羟基衍生物。腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,腔肠素h是海肾荧光素酶的底物,适用于体内外报告基因分析。
本品为体内成像研究的注射用腔肠素h,不仅含有超纯的腔肠素h(>99%),还提供特别设计的Inject-Diluent溶剂,能够程度的溶解腔肠素h,从而Z小化体内注射体积。另外,与传统乙醇溶解的腔肠素h相比,用Inject-Diluent溶解的腔肠素h能得到更好的荧光信号。
产品组成: 组分 | 2×500μg | 20×500μg |
天然腔肠素h | 2×500μg | 20×500μg |
Inject-Diluent | 500μL | 10×500μL |
保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。
操作步骤:1.使用装有23 gauge或更小针头的0.5-1.0ml注射器,吸取150μl温热(35-50℃)的Inject-Diluent。
2.将150μl Inject-Diluent打入腔肠素h瓶内,使用针头和注射器上下吸打或低速涡旋,直至看到完全透明溶液,此时得到腔肠素溶液浓度为3.33mg/ml。如果溶液没有完全透明,用水浴锅或加热板在60-80℃加热几分钟,检查完全透明。
3.按下表,用胰岛素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔肠素h溶液(3.33mg/ml),通过尾静脉注射到动物体内。检查,排气,冲洗针头。使用胰岛素注射器的优势在于很低的液体滞留体积(<2μl)。缓慢注射。
需要的底物质量 | 腔肠素h溶液注射体积 |
50μg | 15μl |
100μg | 30μl |
200μg | 60μl |
250μg | 75μl |
建议按照上表单只小鼠(25g体重)的腔肠素h溶液(3.33mg/ml)注射剂量表
附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性 产品名称 | 货号 | Em(nm) | RLC1① | Relative Intensity② | Half-rise time(ms)③ |
天然腔肠素 | KM0051 | 466 | 1 | 1 | 6-30 |
腔肠素h | KM0097 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
腔肠素400 a | KM0094 | 400 | / | / | / |
腔肠素hcp | KM0091 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
腔肠素cp | KM0090 | 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
腔肠素f | KM0092 | 472 | 0.8 | 20 | 6-30 |
腔肠素n | KM0089 | 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
腔肠素e | KM0093 | 405?& 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
①RLC = relative luminescence capacity:Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0.
②Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+.
③Half-Rise Time:The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50%of the maximum after addition of 1mMCa2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest.
附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异 产品名称 | 货号 | 应用特征 |
天然腔肠素 | KM0051 | 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶的底物。底物的快速再生比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。 1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1μM到>100μM; 2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用; 3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)。 |
腔肠素h | KM0097 | 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上; 2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高; 3)也适用报告基因分析。 |
腔肠素400 a | KM0094 | 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的shǒu选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。 |
腔肠素hcp | KM0091 | 其生物发光强度(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。 |
腔肠素cp | KM0090 | 腔肠素cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。 |
腔肠素f | KM0092 | 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,发射波长约长8nm。具有较好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。 |
腔肠素n | KM0089 | 所有的腔肠素衍生物中荧光强度Z弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。 |
腔肠素e | KM0093 | 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。 |
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温馨提示:不可用于临床ZL。