HypoxyprobeTM Gemini Kit 缺氧探针检测试剂盒

试剂盒组分： 试剂盒组分详细描述：Hypoxyprobe-1是2-硝基咪唑的替代物，其化学名和WY成分是Pimonidazole hydrochloride（PimonidazoleHCl），分子量为290.8，水溶性为400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系数为7020（0.9%生理盐水）。Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如，固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年，UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1，浓度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法评估无任何降解发生。缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团（thiol groups）形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。Hypoxyprobe-F6（CCI-103F）是带有6个磁性相等氟原子的六氟-2-硝基咪唑，分子量为337.2，水溶性为5.3mM（=1.8 mg/ml）。CCI-103F通常以10% DMSO/花生油混合物的形式腹腔注射入动物体内。 三、Anti-Pimonidazole rabbitantiserum (PAb2627）抗体和Anti-CCI-103F rabbit antiserum(PAbF6）抗体感兴趣组织可用免疫组化检测（IHC），冰冻切片或者固定的石蜡包埋切片；也可组织降解后用流式分析法检测；以及WB；对固定、石蜡包埋的连续性组织切片进行免疫过氧化物分析，使用100μl anti-pimonidazole或anti-CCI-103F（1:500稀释）孵育。显色的山羊抗兔二抗用来显示缺氧标记加合物的分布情况。  文件下载：