一氧化氮检测试剂盒(荧光探针法)现货供应

名称：一氧化氮检测试剂盒(荧光探针法)现货供应
规格：100T
产地：国产|进口
编号：KFS313
本荧光探针适合于检测细胞内的一氧化氮水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常至少可以检测100 个样品。

DAF-FM DA 即3-Amino,4-aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate ， 也称DAF-FM diacetate 或4- Amino,5- aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate。DAF-FM DA 是一代用于一氧化氮定量检测的荧光探针，比以前比较常用的一氧化氮荧光检测探针DAF-2 diacetate 有多方面的改进。首先，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，和一氧化氮反应形成的荧光产物受pH 值的影响小，在pH 值大于5.5 时不受pH 值的影响。其次，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者产生的荧光更加稳定，不容易淬灭，这样更加便于检测。另外，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者对一氧化氮的检测灵敏度更高，相同条件下检测灵敏度可以提高接近2 倍，检测浓度可以达到3nM。

DAF-FM DA 可以穿过细胞膜(cell-permeable)，进入细胞后可以被细胞内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM 。DAF-FM 本身仅有很弱的荧光，但在和一氧化氮反应后可以产生强烈荧光，激发波长为495nm，发射波长为515nm。DAF-FM DA 检测一氧化氮的机制可以参考上图。任何可以检测fluorescein 的仪器，包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。右图为DAF-FM 在不同浓度一氧化氮存在时的发射荧光扫描图谱(fluorescence emissionspectra)。DAF-FM DA 的分子量为496.4，分子式为C25H18F2N2O7，HPLC 分析纯度大于98%。本DAF-FM DA 为溶解于DMSO的淡黄色溶液，浓度为5mM。

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·Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
编号：KFS336
英文名称：Ki67 cell proliferation Detection Kit
规格：20T
Ki67 蛋白是细胞周期相关的一种核蛋白，主要表达于细胞增殖分裂的各个时期（G1、S、G2 和M 期），但是在静息的细胞（G0 期）中不表达。Ki67 常用于检测肿瘤细胞的生长指数（免疫组化法利用计算细胞总数中的Ki67 阳性细胞数所占比例得到Ki67 指数）。

Ki67 通常通过标记抗Ki67 的抗体（FITC 绿色荧光）和DNA 染料碘化丙啶（PI，红色）而利用流式细胞仪检测来实现对细胞周期的检测。

操作方法
1. 在Z适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞，离心，（注意1）保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀细胞，完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重悬细胞，加入1ul Ki67 抗体(1μg/106 cells)，室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞，用50μl 抗体孵育液重悬，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室温孵育30 分钟。离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后，离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。


一氧化氮检测试剂盒(荧光探针法)现货供应