Spark pZERO-Blunt Simple Quick Ligation Kit

保存条件本试剂盒于－20 ℃储存。产品概述零背景平末端快速连接试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以GX克隆平末端PCR产物和任何具有平末端的DNA片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的DNA片段都有效。阳性选择载体和插入片段连接仅需5 min即可获得超过90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Spark Pfu polymerase）扩增的平末端PCR产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体Spark pZERO-Blunt Simple。该载体含有致死的自杀基因，当载体与片段连接成功，自杀基因无法正确表达，包含重组子的细胞可以正常生长；当载体与片段连接不成功，载体自连后自杀基因正确表达，包含自连空载体的细胞无法存活，即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。Spark pZERO-Blunt Simple消除了插入位点附近的多克隆酶切位点，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时，酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响，可以大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。