Klenow大片段

特别提示：包括Klenow大片段在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：Klenow大片段
产品货号：JN0070
产品规格：150U×5

  本酶是大肠杆菌DNA聚合酶I经基因工程改造的产物。由于基因重组，其不含有DNA聚合酶I的5´→3´外切核酸酶活性，只具有5´→3´的DNA聚合酶活性和3´→5´的外切核酸酶活性。其中3´→5´的外切核酸酶 的活性较弱，不适用于3´突出端的切平。本品浓度为5U/ul。

产品用途：
1、双脱氧法DNA序列测定。 (Sanger法)
2、突出端的补平。（参见实验方案）
3、使用随机引物进行DNA标记。

活性定义：
在37℃条件下，30分钟内能使10 nmol 的dNTPs渗入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

热失活：75℃，20分钟。

除了Klenow大片段,，我公司还供应以下相关产品：



名称：T7 RNA聚合酶
货号：YT409
规格：1000U
本酶来源于由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T7 RNA Polymerase基因，是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5"→3"RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点：T7 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高*标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T7启动子有高度的特异性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

活性定义： 37℃60分钟内，催化1 nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
失活或YZ：70℃加热10分钟可使T7 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T7 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著YZT7 RNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃

名称：BssSαI限制性内切酶
货号：SV0242
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：NlaIII限制性内切酶
货号：SV0544
规格：2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: <10%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物基因组DNA CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生一个 3´ CATG突出端，能与 Sphl 切割产生的 DNA 片段连接。
NaCl和KCl YZ酶活性，(NH4)2SO4 不YZ酶活性。
若长期保存，建议贮存于 -70℃。Nlalll 在 -70℃ 时的半衰期为 6 个月。

名称：Tth111I限制性内切酶
货号：SV0765
规格：2KU|400U|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，65℃。
浓度:
5,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
Tth111l 产生的 DNA 片段包含有单碱基的 5´突出端，比平端片段更难连接。

名称：RNase H（5 U/μl)
货号：WH0170
规格：500U|5000U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶，而对单链和双链RNA分子则几乎没有活性。经RNase H水解后的产物具有5"-P和3"-OH末端。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶。本制品浓度为5U/μl。

产品特点：
·特异性水解RNA-DNA杂交体中的RNA链；
·几乎没有单链、双链RNA分子和DNA分子的水解活性；
·蛋白比活性高，稳定性好。

适用范围：
1．在二代测序（NGS）应用中，主要用于RNA文库构建过程中cDNA第二链的合成。
2．在cDNA第二链合成时除去mRNA。

产品组成：

组分	WH0170-1	WH0170-2
RNase H	500U	5000U
10×RNase H Buffer	300μl	2×1.5ml

储存条件：-25℃~-15℃保存，保质期一年。

贮存液成分：20mM Tris-HCl，100mM KCl，10mM MgCl2，0.1mM EDTA，0.1mM DTT，50%甘油。

单位定义：1单位酶是指在37℃条件下，在1× RNAse H Buffer体系中，20min水解1nmol[3H]标记的DNARNA杂交双链中的RNA形成酸可溶性核糖核苷酸所需要的酶量。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	625U/μg
单链核酸外切酶	500U酶中，＜0.5%
双链核酸外切酶	500U酶中，＜0.1%
双链核酸内切酶	500U酶中，未检出
宿主基因组污染	500U酶中，＜10拷贝
非特异RNAse残留	500U酶中，未检出

使用方法：
在NGS RNA文库构建过程中，一般按终浓度0.1~0.25U/μl的量加入RNA酶H。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：37℃，20min。
灭活条件：65℃，10 min。