二甲基腔肠素

特别提示：包括二甲基腔肠素在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：二甲基腔肠素
英文名称：Coelenterazine 2-methyl
产品货号：SY0242
产品规格：1×50μg

本品为粉末形式供应的二甲基腔肠素，系天然腔肠素衍生物，具有无毒、细胞膜通透性等特性，是一种细胞强抗氧化剂，可GX作用于细胞内的活性氧，如单态氧和超氧阴离子。由于氧化应激是细胞凋亡过程的中介环节，因此，二甲基腔肠素可能作为一种研究细胞凋亡的重要工具。另，二甲基腔肠素还可通过化学发光法来检测超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子水平。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源zuì丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。


图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用zuì普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择zuì合适的腔肠素底物。

英文别名：Coelenterazine, 2-methyl analog; Methyl Coelenterazine; 2-methyl Coelenterazine
CAS：N/A
分子式：C20H17N3O2
分子量：331.37
溶解性：溶于甲*或乙醇
外观：黄色粉末
纯度：＞98%（TLC）
结构：


注意事项
1）二甲基腔肠素粉末zuì好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成二甲基腔肠素氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

除了二甲基腔肠素,2-methyl Coelenterazine,Coelenterazine, 2-methyl analog,Methyl Coelenterazine，我公司还供应以下相关产品：



名称：NF-κB萤火虫荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0059
规格：1μg
NF-κB-Luc荧光素酶报告基因质粒（NF-κB luciferase reporter plasmid）是用于检测NF-κB转录活性水平为目的的报告基因。NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和YZ细胞凋亡等方面有着重要的作用。

NF-κB荧光素酶报告基因（报告基因质粒）主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-κB的调控机制的研究。

pGMNF-ΚB-Lu是改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点，可以高灵敏度地检测NF-κB的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NF-κB报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
1.pGMNF-Κb-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂，可作为NF-κB报告基因的阳性对照。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：GRE-Luc荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0081
规格：1μg
GRE报告基因（报告基因质粒）（GRE luciferase reporter plasimd）是用于检测glucocorticoidreceptor转录活性水平为目的的报告基因。GR（glucocorticoidreceptor)调控的糖皮质类固醇是强有力的KY介质，并对心血管、新陈代谢、免疫和体内平衡功能进行调节或维持。

GRE报告基因主要应用于糖皮质激素介导的信号途径(glucocorticoid-mediated signaling pathway)的激活水平研究、药物研究以及基因过表达和RNAi表型分析等。

pGMGRE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GR结合位点，可以高灵敏度地检测GR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得GRE报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMGRE-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

名称：STAT5-Luc荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0112
规格：1μg
STAT5荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（STAT5 luciferase reporter plasimd）是用于检测STAT5转录活性水平为目的的报告基因。Stat5是信号转导和转录活化蛋白(signal transduction and activator of transcription,Stat)家族的重要成员，参与了Jak/Stat信号通路调控。Stat5能够影响细胞的增殖、分化、存活与凋亡,并且在乳腺发育、免疫应答、干细胞自我更新调控、造血作用以及肿瘤的发SF展等中具有重要作用。

STAT5报告基因主要用于检测Jak/Stat信号通路调控、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMSTAT5-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个STAT5结合位点，可以高灵敏度地检测STAT5的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得STAT5报告基因更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMSTAT5-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

名称：AARE-GFP报告基因质粒
货号：SY0186
规格：1μg
AARE-GFP报告基因是用于检测ATF4/3/2转录活性水平为目的的报告基因。随着氨基酸的消耗，GCN2被激活并且使elF2a磷酸化，这将使ATF的翻译增加，激活的ATF4将结合AARE调控目的基因的表达。

AARE-GFP报告基因主要检测细胞中Amino Acid Deprivation信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMAARE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AARE结合位点，可以GX地检测ATF4/3/2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得AARE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM AARE-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMAARE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：NRSF-GFP报告基因质粒
货号：SY0223
规格：1μg
NRSF-GFP报告基因是用于检测NRSF转录活性水平为目的的报告基因。NRSF(Neuron-Restrictive Silencer Factor)又被称作REST(RE1-Silencing Transcription factor)主要是在非神经元细胞中阻遏某些神经性基因的表达。随着研究的深入，发现NRSF-REST在神经发育过程中有着复杂的调控功能。

NRSF-GFP报告基因主要应用于Neuron Silencing Factor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMNRSF-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NRSF结合位点，可以GX地检测NRSF的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NRSF-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM NRSF -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMNRSF-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。