货号:
CS-0494X
组织来源:
咨询客服
相关疾病:
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物种来源:
咨询客服
免疫类型:
咨询客服
细胞形态:
咨询客服
是否是肿瘤细胞:
咨询客服
器官来源:
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运输方式:
活细胞/冻存管
年限:
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生长状态:
贴壁/悬浮
英文名:
Human Intervertebral Disc: Normal Nucleus Pulposus Cell Derivatives
注册证号:
咨询客服
数量:
21
供应商:
上海莼试
CAS号:
咨询客服
肿瘤类型:
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细胞类型:
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ATCC Number:
Human Intervertebral Disc: Normal Nucleus Pulposus Cell Derivatives
品系:
咨询客服
规格:
1.2ML/1.5ML
人椎间盘髓核细胞提取物说明书Human Intervertebral Disc: Normal Nucleus Pulposus Cell Derivatives
人椎间盘髓核细胞提取物是从人椎间盘髓核细胞提取的,人椎间盘髓核细胞从正常人椎间盘髓核组织制备。正常人椎间盘髓核组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。以下是人椎间盘髓核细胞提取物说明书产品信息的认购信息: 产品名称 | 人椎间盘髓核细胞提取物说明书 |
英文名称 | Human Intervertebral Disc: Normal Nucleus Pulposus Cell Derivatives |
价格 | 来电可享受优惠 |
人椎间盘髓核细胞提取物说明书冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 Phospho-PDGFRA(Tyr762) 磷酸化小板源性生因子受体α 规格: 0.1mlTRIB2 MAPK调控蛋白TRB2抗体 规格: 0.2mlC2orf44 2号染色体开放阅读框44抗体 规格: 0.2mlSRC src原基因抗体 规格: 0.2mlphospho-ATXN1(Ser775) 磷酸化失调症蛋白1抗体 规格: 0.1mlC5orf35 5号染色体开放阅读框35抗体 规格: 0.2mlphospho-LKB1(Ser428) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抗体 规格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 规格: 0.1mlHFREP1/FGL1 肝细胞源性纤维蛋白原相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlFAM13B1 FAM13B1蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1mlphospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化异染色质蛋白1抗体(果蝇) 规格: 1mlBubR1 有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体 规格: 0.2ml人椎间盘髓核细胞提取物说明书大鼠输尿管上皮细胞完全培养基100mL酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePC-3M(人前列腺细胞)Calu-1(人肺细胞)5×106cells/瓶×2SK-BR-3(人腺细胞)5×106cells/瓶×2T-24(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×21% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口天狼星红染色试剂盒规格:200mlOVCAR-3(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens植物杆菌 Lactobacillus plantarum小鼠巨噬细胞酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus