HCC-1359人肺癌主轴巨细胞系 专业技术指导 专注复苏

HCC-1359人肺癌主轴巨细胞系 专业技术指导 专注复苏
IOSE80细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NAMALWA细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：2传代。3天内可长满。
Tregs细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用5%或10%CO2？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
TMNE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MPC5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
SUDHL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
B12肉汤培养基，英文名：B12 Assay Medium，用途：用于维生素B12检测
BTB培养基，英文名：BTB Medium，用途：用于弧菌的选择性增菌
沙氏葡萄糖琼脂培养基，英文名：Sabouraud’s Glucose Agar Medium，用途：用于真菌培养（ZG药典2010）
TYC肉汤培养基，英文名：Tryptone Yeast Cystine Broth Medium，用途：用于血链球菌的分离,每100ml可选择性添加1支多粘菌素B溶液以增加选择性
细胞形态特性：详见细胞说明书
pH7.0 化钠-蛋白胨缓冲液，英文名：Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0，用途：用于样品制备
自诱导2 ×YT肉汤培养基，英文名：Autoinduction 2 ×YT Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
RS1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
M145细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI-8226[RPMI8826]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠可溶性白介素8受体(Sil-8R/cd128)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Sil-8R/cd128 ELISA Kit，规格：48T/96T
人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒，英文名：Human GR-α ELISA Kit，规格：48T/96T
B12测试培养基，英文名：B12 Assay Medium，用途：用于维生素B12检测
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
6.5%化钠葡萄糖琼脂，英文名：6.5%Sodium Dextrose Agar，用途：用于肠球菌确证和培养
鸟酸脱羧酶试验培养基，英文名：Ornithine Decarboxylase Test Medium，用途：用于细菌的鸟酸脱羧酶试验
精酸支原体半流体培养基，英文名：Mycoplasma Semifluid Medium with Arginine，用途：——用于支原体的培养
假单胞菌分离琼脂，英文名：Pseudomonas Isolation Agar，用途：用于假单胞菌的检验,每升培养基中添加20ml甘油
Rca-B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LIC-0903细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
FHC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 604.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次。
NCI-H520[H520]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-MES-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
小鼠血管非炎性蛋白3(VNN3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse VNN3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒，英文名：DBH ELISA Kit，规格：48T/96T
人突触融合蛋白16(STX16)ELISA试剂盒，英文名：Human STX16 ELISA Kit，规格：48T/96T
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(尿嘧啶缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Urac，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
杜氏缓冲液(不含、镁离子)，英文名：Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline(D-PBS)，用途：用于细胞的洗涤、保存和培养,也用于微生物的培养
抗生素培养基8号，英文名：Medium 8，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
BEL7404细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
SUP-B1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE70细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：5传代
小鼠热休克蛋白40(HSP40)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HSP40 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠黄嘌呤脱酶(XDH)ELISA试剂盒，英文名：XDH ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠内皮素(ET-1)ELISA试剂盒，英文名：ET-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA试剂盒，英文名：NRG-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒，英文名：Human AOAb ELISA Kit，规格：48T/96T
普通肉汤培养基，英文名：Routine Broth Medium，用途：用于金黄色葡萄球菌及其他细菌的增菌
M17肉汤，英文名：M17 Broth，用途：用于牛奶和乳制品中乳酸菌的检测，每100ml添加1支10%乳糖溶液
SSDC培养基/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂(含脱氧胆盐化钠)，英文名：SSDC Medium，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性分离
模拟葡萄汁培养基(MSM)基础，英文名：MSM medium Base，用途：用于摸拟葡萄汁对真菌的培养，每升培养基添加1支脂肪酸溶液
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
LOVO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
HS766T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HCC2935细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：4-1：6传代，每周2-3次。
HT-1080细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4-1：8传代；2-3天换液1次。
M-绿色酵母菌和霉菌肉汤，英文名：m-Green Yeast and Mold Broth，用途：用于饮料中酵母菌和霉菌的检测
ECA109细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
RPPVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TMD8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经80～100目筛网过滤成细胞悬液；3)培养细胞应用PBS洗两遍；4)计数并调整细胞浓度至107～108／ml；5)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml／部位，＞106细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；2)消毒动物，左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞；3)接种腹水瘤细胞后约7~12d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml；4)抽取的腹水经3000rpm离心15min，收集上清，分装冻存备用。
SMMC-7721细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次