EOL-1人急性髓系白血病细胞系 专业技术指导 专注复苏

EOL-1人急性髓系白血病细胞系 专业技术指导 专注复苏
MIN-6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HuH-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
HLE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞冻存基本方法：1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×10(6)/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小Pai，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
K1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
HuUMSCs-11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：悬浮
RK-13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3%NaCl基酸脱羧酶试验对照培养基，英文名：Aminoacid Decarboxylase Test Medium controls with，用途：用于弧菌的基酸试验对照
轻唾液体培养基(MSB)基础，英文名：Mitis Salivarius Broth Base，用途：用于轻唾链球菌的选择性增菌,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
牛津琼脂(OXA)基础，英文名：Oxford Agar Base，用途：用于李氏菌分离,每100ml添加多粘菌素E1支
支原体肉汤基础(Frey)，英文名：Mycoplasma Broth Base（Frey），用途：无红,用于支原体培养,每 100ml 添加 10ml 马血清
细胞形态特性：详见细胞说明书
LT 100琼脂基础，英文名：LT 100 Agar Base，用途：用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
山梨醇麦康凯半固体培养基，英文名：Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium，用途：用于大肠埃希氏菌O157菌种保存
SKOV-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Okul BclxL 50RFP细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H196[H196]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人B-淋巴细胞趋化因子(BLC)ELISA试剂盒，英文名：Human BLC ELISA Kit，规格：48T/96T
人胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)ELISA试剂盒，英文名：Human IGFBP-7 ELISA Kit，规格：48T/96T
巧克力血琼脂培养基基础，英文名：Chocolate Blood Agar Medium Base，用途：用于奈瑟球菌、流感嗜血杆菌的培养,需添5%~10%无菌脱纤维绵羊全血
细胞背景资料：急性髓系白血病；男性
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
煌绿磺胺嘧啶琼脂(BGS琼脂)，英文名：Brilliant Green Agar with Sulfadiazine，用途：含磺胺嘧啶,用于沙门氏菌的选择性分离
霉菌液体培养基，英文名：Mould Broth Medium，用途：不含化钠,用于霉菌的增菌
亮绿乳糖胆盐培养液(BGB)，英文名：Brilliant Green Lactose Bile Broth，用途：用于饮用天然中大肠杆菌的检验
Leeming-Notman培养基基础，英文名：Leeming-Notman Medium，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加1.6ml橄榄油
OVCA432细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LN382细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ABC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NRK49F细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L5178Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLA-802细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA试剂盒，英文名：Human OH)2D3/DVD/DHVD 3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA试剂盒，英文名：Human HGV-IgM ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TSPAN30 ELISA Kit，规格：48T/96T
3.5%化钠三糖铁琼脂，英文名：3.5% TSI Agar，用途：用于弧菌生化筛选
固氮螺菌液体培养基，英文名：Azospirillum Broth Medium，用途：用于固氮螺菌的培养
TYM培养基基础，英文名：Diamond’s TrypticaseYeast Extract Maltose Complete，用途：用于阴道毛滴虫等寄生虫培养,需添加10%动物血清
HFSF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
HEC1-A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
P815细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒，英文名：Human LDLR ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3(MIP-3)ELISA试剂盒，英文名：MIP-3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒，英文名：Trx ELISA Kit，规格：48T/96T
人糖原合成酶2(GYS2)ELISA试剂盒，英文名：Human GYS2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠胎盘碱性酶(PLAP)ELISA试剂盒，英文名：PLAP ELISA Kit，规格：48T/96T
桔汁肉汤(10倍浓缩)，英文名：Orange Serum Broth Concentrate 10×，用途：用于耐酸细菌的培养
紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基/结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂，英文名：Violet Red Bile Glucose Agar，用途：用于肠道菌计数
Starky代钠琼脂培养基，英文名：Starky -Na2S2O3 Agar Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
乳糖TTC琼脂基础，英文名：Lactose TTC Agar Base，用途：用于水中大肠菌群的滤膜法测定,每200ml添加1支0.5%TTC溶液
阿须贝氏无氮培养基，英文名：Ashby’s Nitrogen-Free Agar，用途：用于固氮菌的培养
HeLa229细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 742.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
AtT20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COLO394细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
含糖牛肉汤琼脂培养基，英文名：Beef soup Agar Medium with Lactose，用途：用于乳酸菌计数
HE-MEF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SPA-A1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW620细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
G-292, clone A141B1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代；每周换液2-3次