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HARA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
抗生素培养基F(PH6.1),英文名:Medium F(PH6.1),用途:用于抗生素鉴定
霉菌琼脂培养基,英文名:Mould Agar Medium,用途:含琼脂,用于霉菌分离培养
兔血浆纤维蛋白原(RPF)琼脂培养基基础,英文名:RPF Agar Medium Base,用途:用于凝固酶阳性葡萄球菌检测,需添加兔血浆和YJ剂
营养肉汤(NB),英文名:Nutrient Broth,用途:用于细菌的培养和增菌
细胞生长特性:贴壁
胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA),英文名:Soybean-Casein Digest Agar,用途:用于YJ剂效力检查(ZG药典2010)
10%化钠胰酪胨大豆肉汤,英文名:10% Sodium Chloride Tryptic Soy Broth,用途:用于金黄色葡萄球菌的增菌和MPN试验
小鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)ELISA试剂盒,英文名:Mouse LCAT ELISA Kit,规格:48T/96T
人乳腺珠蛋白A(SCGB2A2)ELISA试剂盒,英文名:Human SCGB2A2 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠结肠癌抗原(CCA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CCA ELISA Kit,规格:48T/96T
人前列腺蛋白类脂肪酶B(LIPB)ELISA试剂盒,英文名:Human LIPB ELISA Kit,规格:48T/96T
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择Z合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Z快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤Z好使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个Z重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
人胎盘黏蛋白(CDHP)ELISA试剂盒,英文名:Human CDHP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
人酸酯酶2(SULF2)ELISA试剂盒,英文名:Human SULF2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Gremlin人1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒,英文名:Human GREM1 ELISA Kit,规格:48T/96T
PA12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
hTERT RPE-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CAL-51细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
me7o细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CPAE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
293T/17细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hela229[HeLa229]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
MLO-Y4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
碱性胆盐琼脂,英文名:Alkaline Bile Salt Agar,用途:用于霍乱弧菌的选择性分离
药敏试验琼脂,英文名:Sensitivity Disk Agar,用途:用于抗生素药敏试验
O/F试验用培养基(HLGB),英文名:O/F Medium,用途:用于弧菌葡萄糖利用试验(O/F试验)
Campy-Cefex 琼脂培养基基础(改良Campy-Cefex 琼脂基础),英文名:Campy-Cefex Agar Medium Base,用途:每200ml添加10ml马血和1支Campy-Cefex 琼脂培养基基础添加剂;若制备改良Campy-Cefex 琼脂
人突触蛋白Ⅰ(SYN1)ELISA试剂盒,英文名:Human SYN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CRH ELISA Kit,规格:48T/96T
人羰基还原酶3(CBR3)ELISA试剂盒,英文名:Human CBR3 ELISA Kit,规格:48T/96T
SL-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:口腔角质细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FRhK-4[FRhK4]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2405[H2405]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
含0.05%聚山梨酯80的 pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液,英文名:Buffered Sodium Chloride-peptone pH 7.0 w Tween 80,用途:用于样品制备
MRS培养基(改良MRS培养基基础),英文名:MRS Medium(Modified MRS Medium Base),用途:用于乳酸菌计数,改良MRS培养基每100ml需添加1支莫匹罗星锂盐储备液
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
肺炎支原体肉汤基础,英文名:Mycoplasma pneumonia Broth Base,用途:含红,用于肺炎支原体培养,需添加小牛血清及YJ剂
A-704细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
K1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-387细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
P31/FUJ细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:5传代
山梨醇麦康凯半固体培养基,英文名:Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium,用途:用于大肠埃希氏菌O157菌种保存
CATC琼脂,英文名:CATC Agar,用途:含TTC,用于肠球菌的分离和培养
淀粉水解培养基,英文名:Starch Hydrolysis Medium,用途:含3%淀粉,用于细菌淀粉水解试验,乳酸菌、链球菌和白喉杆菌等需加5%羊血清
庆大霉素琼脂基础,英文名:Gentamicin Agar Base,用途:用于霍乱弧菌选择性分离,每100ml添加1支庆大霉素琼脂基础添加剂
改良CCD琼脂基础,英文名:Modified CCD Agar Base,用途:用于弯曲菌选择性分离,每100ml添加1支 弯曲菌分离琼脂添加剂(头孢哌酮、两性霉素B、利福平)
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
麦芽汁琼脂培养基(含霉素),英文名:Malt Agar Medium with Chloramphenicol,用途:用于真菌的培养和保存
A1培养基,英文名:A1 Medium,用途:用于水源中大肠菌群的检验
HK-2C细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HASMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Lewis细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RAW 264.7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。