COR-L105人原发性非小细胞肺癌细胞系 复苏时间短 更专注
NCI-H2141细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:聚团悬浮;细胞传代方法:3-4天换液1次。
厌氧卵黄琼脂基础,英文名:Anaerobic Egg Yolk Agar Base,用途:用于肉毒梭菌增菌分离,每100ml培养基中添加3支50%卵黄盐水悬液
TGY琼脂培养基,英文名:Tryptone Glucose Yeast Agar Medium,用途:用于芽孢菌的培养
HO-1-N-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GLAG-66细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SW116细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSAS1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCPEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
N6培养基,英文名:N6 Medium,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
RV沙门菌增菌液体培养基/RV沙氏增菌肉汤,英文名:Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth,用途:用于沙门氏菌选择性增菌
改良NBB肉汤基础,英文名:NBB Broth Base,Modified,用途:用于啤酒中微生物的检测
TA2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
HCO细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
H1299细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,英文名:Human MIP-5 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠总β淀粉样蛋白(βAP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse βAP ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒,英文名:OIT3 ELISA Kit,规格:48T/96T
含6.5%化钠脑心浸液肉汤/高盐度脑心浸液肉汤,英文名:Brain Heart Infusion Broth with 6.5%NaCl,用途:用于细菌增菌与确证
淀粉培养基,英文名:Starch Medium,用途:用于细菌淀粉水解试验
橄榄油培养基基础,英文名:olive oil medium for Malassezia,用途:用于马拉色菌的培养,每80ml添加3.2ml橄榄油
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞Z好,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
3%化钠三糖铁琼脂,英文名:3% TSI Agar,用途:副溶血性弧菌生化试验
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒,英文名:Human VMA ELISA Kit,规格:48T/96T
人血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒,英文名:Human BK ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒,英文名:DKK1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Ets变异体3(ETV3)ELISA试剂盒,英文名:Human ETV3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人干扰素α4(IFNα4)ELISA试剂盒,英文名:Human IFNα4 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠蛋白1(SEPE-1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SEPE-1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠甘露糖结合蛋白(MBL)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MBL ELISA Kit,规格:48T/96T
人Apelin人36蛋白(AP36)ELISA试剂盒,英文名:Human AP36 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
T24细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞背景资料:详见相关文献介绍
RKO-AS45-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LAPTg肉汤,英文名:LAPTg Broth,用途:用于乳酸菌的培养
APT琼脂,英文名:APT Agar,用途:用于乳酸菌的分离培养
HEK-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
脑心浸出液肉汤(BHI),英文名:Brain Heart Infusion Broth,用途:用于金黄色葡萄球菌培养(GB4789)
乳酸杆菌选择性肉汤(LBS肉汤),英文名:Lactobacillus Selective Broth,用途:用于乳酸菌的选择性培养,每升需添加1.32ml冰乙酸
TGYA培养基,英文名:Tryptone Glucose Yeast Agar,用途:用于菌落总数测定 药典
选择性牛心汤增菌培养基,英文名:Selective Cattle Heart Enrichment Broth,用途:用于链球菌选择性增菌
NCI-H226细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H1092细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:随细胞的密度而增加
Mueller-Hinton琼脂/MH琼脂,英文名:Mueller-Hinton Agar,用途:用于细菌药敏试验
营养半固体琼脂(NSA),英文名:Nutrient Semisolid Agar,用途:用于细菌鉴定试验 GB4789.31
HCC2185细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AML-193细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
HEK293F细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Jurkat,CloneE6-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
发根农杆菌培养基(YEB),英文名:Agrobacterium rhizogene Medium,用途:用于发根农杆菌的培养
细胞形态特性:详见细胞说明书
缓冲蛋白胨水(BPW),英文名:Buffered Peptone Water,用途:用于沙门氏菌、阪崎杆菌的增菌(日本标准)
马铃薯蔗糖琼脂,英文名:Potato Sucrose Agar,用途:用于真菌的培养
CT26.WT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:4-1:10传代,2-3天换液1次。