COS-1SV40转化的非洲绿猴肾细胞系 消化过后还贴壁怎么办

COS-1SV40转化的非洲绿猴肾细胞系 消化过后还贴壁怎么办
mEI琼脂，英文名：mEI Agar，用途：用于肠球菌快速测定
纤维素分解菌培养基(纤维素刚果红培养基)，英文名：Cellulose Decomposing Microorganisms Medium，用途：用于纤维素分解菌分离鉴别,纤维素分解菌周围有红色分解圈
碳琼脂，英文名：Charcoal Agar，用途：用于苛氧菌尤其是百日咳博鲍特氏菌培养
人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)ELISA试剂盒，英文名：Human EAR3 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞传代方法：1：2传代
小鼠血吸虫(schistosoma)ELISA试剂盒，英文名：Mouse schistosoma ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒，英文名：CT ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：1)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在1-2min)；2)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加6-8ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；4)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周2-3次)，待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时)；2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养；3)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
RH30[RC13,RMS13,SJRH30]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：该细胞源自CV-1细胞株，经转染编码野生型T抗原、起始点缺陷突变的SV40得到；细胞中整合有SV40基因组完整早期区段的单个拷贝。该细胞表达T抗原，适用于需要SV40T抗原表达的载体的转染；保留SV40溶细胞性生长的特性；支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制；支持早期区段缺失的SV40纯体的复制。因含有SV40的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。
A20细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI6666细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Mahlavu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MS培养基，英文名：Murashige & Skoog Medium，用途：含琼脂，广泛用于植物器官、花药、细胞和原生质体的培养
改良MSRV肉汤培养基基础(MSRV肉汤培养基基础)，英文名：Rappaport-Vassiliadis Broth Medium, Modification，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml需添加2mg新生霉素
COR-L88细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
GEO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MOLM-16细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TK10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；2-3天换液1次。
Raka-Ray琼脂，英文名：Raka-Ray Agar，用途：用于啤酒和酿造过程中乳酸菌的分离,每100ml添加β-乙醇、吐温80各1支
DNA酶试验琼脂，英文名：Dnase Test Agar，用途：用于核糖核酸酶检测,含0.2%DNA
豆芽汁葡萄糖琼脂培养基，英文名：Soybean sprout Extract Glucose Agar Medium，用途：用于真菌尤其是霉菌的培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H716细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长，聚团，少数贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3—1：6传代，每周换液2—3次
淡水鱼类琼脂培养基(FWA)，英文名：Fresh water fish Agar Medium，用途：用于淡水鱼体内细菌的检测
蛋白胨水培养基，英文名：Peptone Water Medium，用途：用于细菌靛基质试验
Cates-1B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Cates-1B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HANK1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
脑心浸出液肉汤(BHI/BHIB)，英文名：Brain Heart Infusion Broth，用途：用于细菌尤其是葡萄球菌的增菌和培养（SN/ISO）
改良GC肉汤基础，英文名：Modified Giolitti-Cantoni Broth Base，用途：用于葡萄球菌MPN计数,需添加0.1ml1%亚碲酸钾溶液(1%亚碲酸钾溶液)
抗生素培养基10号，英文名：Medium 10（Polymyxin Seed Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效价,每100ml添加1支吐温80
人IV型胶原(COL4)ELISA试剂盒，英文名：Human COL4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒，英文名：Human MAPKAPK3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人幽门螺旋杆菌蛋黄免疫球蛋白Y(HP-IgY)ELISA试剂盒，英文名：Human HP-IgY ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MOLM-16细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2171[H2171]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LB肉汤(Lennox)，英文名：LB Broth,Lennox，用途：用于分子生物学中大肠杆菌的培养
霉菌琼脂培养基，英文名：Mould Agar Medium，用途：含琼脂,用于霉菌分离培养
mCPC琼脂基础(CC琼脂基础)，英文名：Modified Cellobiose-Polymyxin B-Colistin Agar Base，用途：用于创伤弧菌的分离,每90ml添加2支25%纤维二糖溶液、1支多粘菌素E和1支多粘菌素B溶液
大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒，英文名：BMPs ELISA Kit，规格：48T/96T
血清必须贮存于–20～-70℃，若存放于4℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久，若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心3000rpm，5min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”，但在37℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒，英文名：Mouse BTA ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：成纤维细胞样
大鼠大肠癌专一抗原4(CCSA-4)ELISA试剂盒，英文名：CCSA-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
6T-CEM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
SK-N-FI细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4传代，每周换液2次
MUS-M1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUP-T3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
念珠菌BCG琼脂基础，英文名：Candida BCG Agar / Candida Bromcresol Green Agar，用途：用于念珠菌的选择性分离和培养,每200ml添加5支新霉素溶液
细胞生长特性：贴壁生长
改良NBB琼脂基础，英文名：NBB Agar Base,Modified，用途：用于啤酒中厌氧菌的检测
麸皮琼脂培养基，英文名：Wheat Bran Agar Medium，用途：用于细菌、真菌的培养
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s)，弃之，再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用2%利多卡因消化5-8分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用0.04%的EDTA冲洗一次，再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
MRS培养基/MRS琼脂(改良MRS培养基基础)，英文名：de Man, Rogosa an Medium(Modified MRS Medium Base)，用途：用于乳酸菌计数,改良MRS培养基每100ml需添加1支莫匹罗星锂盐储备液
HCMEC-D3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Kit225细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。