NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 复苏技术经验丰富

NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SW 1353细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2传代。3天内可长满。
LS180细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI8226细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WIL2-S细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
F81细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Mel624细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCI-AML4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EB2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：4 X 105 cells/mL and maintain at between 4 X 105 and 1 X 106 cells/mL.，每2-3天换液
SW948细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：5传代，每周换液1-2次
FAT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC-1833细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SCL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MKN-28(MKN-74)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
U251细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：多角；细胞传代方法：1：2传代
PC-9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW579 [SW 579;SW-579]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
胰酪蛋白胨葡萄糖酵母浸粉牛肉浸粉培养基(TPGYB)，英文名：Trypticase peptone Glucose Yeast Extract Beef，用途：用于肉毒梭菌增菌培养
根瘤菌培养基Ⅱ基础，英文名：Nodule Bacteria Medium Ⅱ Base，用途：用于根瘤菌的保藏和培养
动力-盐培养基(B法)基础，英文名：Power-nitrate Medium，用途：用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
GAM肉汤，英文名：Glfu Anaerobic Medium Broth，用途：用于厌氧菌的培养
脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基基础，英文名：Skimmed Milk Sucrose Peptone Medium Base，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别,每100ml添加1支20%脱脂奶粉溶液
DPD培养基，英文名：DPD Medium，用途：用于原生质体的培养
HCT116[HCT116]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NRK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
FLS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
K562细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；圆形；细胞传代方法：维持细胞浓度在1×105-1×106/ml,每2-3天换液1次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
SNU423细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MCF7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TM4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；每周2-3次。
L5178Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
CEM/C1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
人p53正向凋亡调控因子(PUMA)ELISA试剂盒，英文名：Human PUMA ELISA Kit，规格：48T/96T
人生长分化因子5(GDF5)ELISA试剂盒，英文名：Human GDF5 ELISA Kit，规格：48T/96T
人基质抗原1(STAG1)ELISA试剂盒，英文名：Human STAG1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse STUB1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠突触素(SYP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse SYP ELISA Kit，规格：48T/96T
人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA试剂盒，英文名：Human GLUT4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒，英文名：Human TIMP-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠Ⅰ型胶原α2(COL1α2)ELISA试剂盒，英文名：COL1α2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒，英文名：Human PA-IgG/M/A ELISA Kit，规格：48T/96T
Todd-Hewitt肉汤，英文名：Todd-Hewitt Broth，用途：用于β-溶血素制备
布氏琼脂，英文名：Brucella Agar，用途：用于布鲁氏菌属的培养
赖酸培养基(LYS)，英文名：Lysine Medium，用途：用于啤酒野生酵母检验,需添加乳酸钾并使用乳酸校正酸碱度
VRE琼脂基础，英文名：VRE Agar Base，用途：每升培养基添加1mg美罗培南和6mg万古霉素制成VRE′S
MH-S细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW 1088[SW-1088,SW1088]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BPH-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁生长
改良R2A琼脂，英文名：R2A Agar, Modified，用途：用于固氮弧菌的培养
Endo培养基，英文名：Endo Medium，用途：用于大肠菌群的检测
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE)，英文名：Trypticase Soy-Yeast Extract Agar，用途：用于单核增生李斯特氏菌的纯化培养
胰蛋白月示琼脂，英文名：Tryptose Agar，用途：用于各种苛养微生物尤其是布氏杆菌的培养
连四盐肉汤培养基基础，英文名：Fluid Tetrathionate Medium Base，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：成纤维细胞样　
A-431细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
HTMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠脂解激活脂蛋白受体(LSR)ELISA试剂盒，英文名：Mouse LSR ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌球蛋白ⅩⅨ(MYO19)ELISA试剂盒，英文名：Human MYO19 ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒，英文名：Human Cyclin-D3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠信号传导转录激活因子5B(STAT5B)ELISA试剂盒，英文名：STAT5B ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠粒细胞趋化蛋白2(GCP2)ELISA试剂盒，英文名：GCP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞的冻存：目前，细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×10(6)～1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)，英文名：Pfizer Enterococcus Selective Agar，用途：用于粪链球菌选择性分离
BCG牛乳培养基，英文名：Bromcresol Green Skim Milk Medium，用途：用于乳酸菌培养
改良GAM肉汤基础，英文名：Glfu Anaerobic Medium Broth Base,Modified，用途：用于厌氧菌的培养,每100ml添加化血红素溶液、维生素K1溶液各1支
解脲支原体琼脂基础，英文名：Ureaplasma urealyticum Agar Base，用途：用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
Iso-Sensitest 肉汤，英文名：Iso-Sensitest Broth，用途：用于抗生素药敏试验