DMS 79人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

DMS 79人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
PG13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCCLM6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C2C12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；梭形；细胞传代方法：1：2传代
P3X63Ag8.653细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结：1)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%，不要低于5%或高过20%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%，可以适量加减；2)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；3)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；4)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；6)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
HCC1419细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JK(Jurkat)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
D283med细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HPAF-II细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
Lewis细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AZ521细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE-70细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COLO 201细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮+贴壁；细胞形态特性：淋巴细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI/ADR-RES细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KATOⅢ细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW1990细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ECC10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周换液2-3次。
缓冲蛋白胨水(BPW)/缓冲胨水增菌液(BP)，英文名：Buffered Peptone Water，用途：用于沙门氏菌、阪崎杆菌的增菌
黄原胶液体发酵培养基(葡萄糖)，英文名：Xanthan gum Fluid Medium with Dextrose，用途：以葡萄糖为碳源,用于黄原胶生产
UM琼脂培养基，英文名：Uchimiya and Miurashige Medium，用途：用于诱导愈伤组织形成
史娃兹鉴别培养基(SDM)，英文名：Schwartz Differential Medium，用途：用于啤酒野生酵母的检验
番茄汁琼脂，英文名：Tomato Juice Agar，用途：用于乳酸菌的培养和计数
酵母粉葡萄糖霉素琼脂(YGC)，英文名：Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar，用途：用于霉菌酵母菌的分离和计数
C6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
VX-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3T3-L1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
LUDLU-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NCI-H1092细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU423细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PIG3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RS1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
NEI-H209细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MMP-7 ELISA Kit，规格：48T/96T
人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)ELISA试剂盒，英文名：Human aFGF ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒，英文名：C3 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ANA ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒，英文名：KGF ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌球蛋白重链8(MYH8)ELISA试剂盒，英文名：Human MYH8 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠趋化因子C-X-C-基元受体4(CXCR4)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CXCR4 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IFNγ ELISA Kit，规格：48T/96T
人晶状体蛋白μ(CRYμ)ELISA试剂盒，英文名：Human CRYμ ELISA Kit，规格：48T/96T
毛藓菌琼脂4号，英文名：Trichophyton Agar #4，用途：用于毛藓菌属的鉴定
Bolton增菌培养基基础(含化血红素)，英文名：Bolton Enrichment Medium with chlorhematin Base，用途：用于弯曲菌选择性增菌,每100ml中添加Bolton增菌培养基基础添加剂
三糖铁琼脂培养基(TSI)，英文名：Triple Sugar Iron Agar Medium，用途：用于细菌生化试验
NZCYM肉汤，英文名：NZCYM Broth，用途：用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
HCC1599细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：每3-4天换液
BJAB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDCK-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：悬浮生长
Herrold’s 卵黄琼脂基础，英文名：Herrold’s Egg Yolk Agar Base，用途：用于副结核杆菌的分离和鉴别，每87.3ml培养基添加10ml卵黄和2.7ml甘油，视需求可添加抗生素
BMGY/BMMY培养基基础，英文名：BMGY/BMMY Medium Base，用途：用于毕氏酵母的诱导表达,需添加YNB（酵母氮源基础、无基酸）及生物素等
霍乱双糖铁琼脂，英文名：Cholera Double Sugar Iron Agar，用途：用于霍乱弧菌生化试验
改良盐缓冲液，英文名：Modified Phosphate Saline Buffer，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE)，英文名：Trypticase Soy-Yeast Extract Broth，用途：用于单核增生李斯特氏菌的培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：详见细胞说明书
SN12-PM6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H358细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人眼质蛋白(OCLM)ELISA试剂盒，英文名：Human OCLM ELISA Kit，规格：48T/96T
人乳酸脱酶C(LDHC)ELISA试剂盒，英文名：Human LDHC ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠α晶体B链(CRYaB)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CRYaB ELISA Kit，规格：48T/96T
人驱动蛋白家族成员14(KIF14)ELISA试剂盒，英文名：Human KIF14 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素12(SIGLEC12)ELISA试剂盒，英文名：Mouse SIGLEC12 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养基应用选择：选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择培养基，这是Z客观的方法，但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件：293人胚胎肾细胞培养条件：MEM,10%热灭活马血清；IMR-90人肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；W1-38人胚胎肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；A549人肺癌上皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清；A431人表皮癌细胞培养条件：DMEM,10%胎牛血清；BHL-100人乳房上皮细胞培养条件：McCoy', 10%胎牛血清；BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件：F-12K,15%胎牛血清；Caco-2人结肠腺癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Chang人肝脏上皮细胞培养条件：BME,10%小牛血清；HCT-15人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；HEp-G2人肝细胞癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清和NEAA；HEp-2人喉癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清;或RPMI-1640,10%胎牛血清；HT-29人结肠腺癌上皮细胞培养条件：McCoy',10%胎牛血清；JEG-2人绒毛膜癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；KB人口腔癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Saos-2人骨肉瘤上皮细胞培养条件：McCoy',15%胎牛血清；WI-38人胚胎肺上皮细胞培养条件：BME,10%胎牛血清；WISH人羊膜上皮细胞培养条件：BME, 10%胎牛血清；HUVEC人脐带内皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清和肝素100ug/ml；IM-9人瘤成淋巴细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Daudi人淋巴瘤细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Clone M-3小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件：F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清；BHK-21仓鼠肾成纤维细胞培养条件：GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAA；CHO-K1仓鼠卵巢上皮细胞培养条件：F-12,10%胎牛血清；IEC-6大鼠正常小肠上皮样培养条件：DMEM,5%胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml；COS-1猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-3猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-7猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清
NZYM肉汤，英文名：NZYM Broth，用途：用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
改良牛津培养基(MOX)基础，英文名：Modified Oxford Medium Base，用途：用于李氏菌分离培养,每200ml添加1支多粘菌素E和2支拉氧头孢溶液
Trans-Vag肉汤基础，英文名：Trans-Vag Broth Base，用途：用于链球菌的选择性分离，每100ml添加庆大霉素溶液、啶酮酸溶液各1支
GYCA培养基，英文名：Glucose Yeast extract Calcium carbonate Medium，用途：用于甘蔗流胶病菌检验
DRBC培养基，英文名：DRBC Medium，用途：用于食品中霉菌及酵母菌的分离培养和计数