NCI-H157人非小细胞肺腺癌细胞系 细胞ZX复苏传代

NCI-H157人非小细胞肺腺癌细胞系 细胞ZX复苏传代
光合细菌培养基Ⅰ，英文名：Photosynthetic Bacteria Medium，用途：用于光合细菌的培养
抗生素培养基9号，英文名：Medium 9（Polymyxin Base Agar，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
血液增菌培养基，英文名：Blood Enrichment Medium，用途：用于血液中致病菌的分离
NT培养基，英文名：NT Medium，用途：含激素（6-BA、NAA），不含琼脂，用于原生质体的培养
大鼠Ⅱ型胶原α1(COL2α1)ELISA试剂盒，英文名：COL2α1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒，英文名：UBC ELISA Kit，规格：48T/96T
NCI-H378[H378]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
番茄汁特制琼脂，英文名：Tomato Juice Agar Special，用途：用于唾液和其他标本中乳酸菌等嗜酸微生物的培养
无乳固氮螺菌培养基，英文名：Azospirillum Amazonense Medium，用途：用于无乳固氮螺菌的培养
细胞背景资料：详见相关文献介绍
精酸支原体琼脂培养基，英文名：Mycoplasma Agar Medium with Arginine，用途：——用于支原体的培养
甘露醇发酵培养基，英文名：Mannitol Fermentation Medium，用途：用于甘露醇发酵试验
Pt K1(NBL-3)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
SW 982 [SW-982,SW982]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
293C18(293E)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射30分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
Sall BclxL C2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H1581[H1581]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RASMCs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液；2)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度，离心，去上清；3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；4)分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液；5)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；6)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃/min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成；3)冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加10ml培养液；4)低速离心(500～1000r/min) 5min，去上清后再用培养液洗一次；5)用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到10(7)/ml，在融后稀释20倍时，仍能保持5×10(5)/ml数量。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞复苏相关注意事项：1.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。2.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)Z好选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。4.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。5.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
IPI-2I细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LCC1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC1954 BL细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HIEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NG108-15 [108CC15]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样　；细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
GAK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：8.4 x 10^4 cells / sq.cm.
NCI/ADR-RES细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Stuart运送培养基，英文名：Stuart Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
葡萄糖半固体琼脂，英文名：Dextrose Semisolid Agar，用途：用于葡萄糖利用(产酸、产气)实验
M9CA肉汤，英文名：M9CA Broth，用途：用于培养重组大肠杆菌菌株
细胞生长特性：贴壁生长　
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
GL261细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SHZ-88细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSAS3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CEL细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC-9724细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
HEF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GP2-293细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
HMC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
乳糖胆盐发酵培养基，英文名：Lactose Bile Broth，用途：用于大肠菌群测定
大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒，英文名：CDK5 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：详见细胞说明书
大鼠食欲素B(OX-B)ELISA试剂盒，英文名：OX-B ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)ELISA试剂盒，英文名：PECAM1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠白介素8(IL-8)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IL-8 ELISA Kit，规格：48T/96T
CNLMG-B5537SKIN细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2110细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3-1：6传代，每周换液2-3次
模拟葡萄汁培养基(MSM)基础，英文名：MSM medium Base，用途：用于摸拟葡萄汁对真菌的培养，每升培养基添加1支脂肪酸溶液
血琼脂基础2号，英文名：Blood Agar Base No2，用途：用于细菌的培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC琼脂基础)，英文名：Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC Agar Base)，用途：用于O157菌选择性分离,每100ml中添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支,组成改良山梨醇麦康凯琼脂
脱弧菌培养基基础，英文名：Desulfovibrio Medium Base（DSMZ Medium 63），用途：用于脱弧菌的培养，每100ml添加1支脱弧菌培养基添加剂
人安定结合YZ因子(DBI)ELISA试剂盒，英文名：Human DBI ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2传代
大鼠血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒，英文名：PF4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒，英文名：Human DNase-Ⅰ ELISA Kit，规格：48T/96T
U14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
UMUC-14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
抗生素培养基1号，英文名：Medium 1（Penassay Seed Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
GYCA培养基，英文名：Glucose Yeast extract Calcium carbonate Medium，用途：用于甘蔗流胶病菌检验
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)，英文名：Violet-Red Bile Agar with Glucose and Lactose，用途：含乳糖、葡萄糖。用于阪崎肠杆菌的分离
人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒，英文名：Human PC ELISA Kit，规格：48T/96T
人趋化因子CC受体8(CCR8)ELISA试剂盒，英文名：Human CCR8 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠化可的松(HYD)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HYD ELISA Kit，规格：48T/96T
U-937细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1563细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2次。
CMT-64细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。