MOLT-4人急性淋巴母细胞性白血病细胞系 细胞ZX复苏传代
1M盐缓冲液(pH6.0),英文名:Phosphate solution(1M,pH6.0),用途:用于毕氏酵母表达培养基的制备
含糖牛肉汤培养基,英文名:Beef soup Medium with Lactose,用途:用于乳酸菌培养和鉴别
抗生素培养基H(PH7.8-8.0),英文名:Medium H(PH7.8-8.0),用途:用于抗生素检验
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA),英文名:Potato Dextrose Agar Medium,用途:ZG药典2015,用于霉菌和酵母菌计数
人中间密度脂蛋白(IDL)ELISA试剂盒,英文名:Human IDL ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠角蛋白生长因子受体(KGFR)ELISA试剂盒,英文名:KGFR ELISA Kit,规格:48T/96T
mSk-FBCs-12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NHA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BTB培养基,英文名:BTB Medium,用途:用于弧菌的选择性增菌
Todd-Hewitt肉汤,英文名:Todd-Hewitt Broth,用途:用于β-溶血素制备
细胞背景资料:MOLT-4与MOLT-3来源于一名19岁的男性急性淋巴细胞性白血病的复发患者,该患者前期接受过多种药物联合化疗。MOLT-4细胞系为T淋巴细胞起源,p53基因的第248位密码子有一个G→A突变,不表达p53,不表达免疫球蛋白或EB病毒;可产生高水平的末端脱氧核糖转移酶;表达CD1(49%),CD2(35%),CD3A(26%)B(33%)C(34%),CD4(55%),CD5(72%),CD6(22%),CD7(77%)。
MKTTn肉汤基础,英文名:Muller Kauffmann Tetrathionate Novobiocin Broth Ba,用途:用于沙门氏菌增菌,每100ml中添加1支碘溶液和2支新生霉素储备液
动力培养基,英文名:Power Medium,用途:用于细菌动力试验
IM9细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KASUMI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:原粒细胞;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
CNLMG-B5537SKIN细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
BIN-S1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L-cell细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BEP2D细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
以下对初次培养细胞人员来说,是非常好的开门教程:准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台;配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液);培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录);必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌:定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外灯照射;实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟;实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台;实验人员的无菌准备:肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦净双手。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力Z好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
HN4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BNL CL.2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
MDBK(NBL-1)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
THC8307细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H716 [H716]细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SF763细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW620[SW620,SW-620]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
马铃薯葡萄糖水(PD水),英文名:Potato Dextrose Water,用途:用于真菌培养和GVC培养基的制备(每100ml添加1支GVC增菌液添加剂)
Eugon 肉汤,英文名:Eugon Broth,用途:用于细菌的培养和增菌
3%NaCl赖酸脱羧酶试验培养基,英文名:Lysine-decarboxylase Test Medium with 3%NaCl,用途:用于弧菌的赖基酸脱羧酶试验
细胞生长特性:悬浮生长
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(组酸/亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
MODE-K细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
EMT-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CEL细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCASMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MCA38细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H1792细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PC-12[PC12]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HRCEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HE琼脂培养基,英文名:Hektoen Enteric Agar Medium,用途:用于肠道菌选择性分离(符合美国药典USP)
小鼠神经调节素4(NRG4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NRG4 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞形态特性:淋巴母细胞样;圆形
人Rap鸟嘌呤交换因子1(RAPGEF1)ELISA试剂盒,英文名:Human RAPGEF1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒,英文名:Human P-CK ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠载脂蛋白P(APOP)ELISA试剂盒,英文名:APOP ELISA Kit,规格:48T/96T
HCC4006细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:4-1:6传代,每周2-3次。
HSC-T6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
气单胞菌琼脂(胆盐红亮绿琼脂),英文名:Aeromonas Agar(Bile Salt Irgasan Brilliant Green,用途:强选择性培养基,用于气单胞菌选择性分离
M-肉汤,英文名:M-Broth,用途:用于干燥食品和种子中沙门氏菌的增菌和培养
胆汁液态培养基,英文名:Bile Broth Medium,用途:用于粪链球菌验证和培养
乳酸菌霉素琼脂2,英文名:Lactobacillus Chloramphenicol Agar 2,用途:——用于干酪乳杆菌和乳酸片球菌的培养
小鼠X-框结合蛋白1(XBP1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse XBP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2传代
人分拣连接蛋白15(SNX15)ELISA试剂盒,英文名:Human SNX15 ELISA Kit,规格:48T/96T
人磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒,英文名:Human PLD ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H1915细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2—3次
BEND细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(亮酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Leuc,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
霉菌琼脂培养基,英文名:Mould Agar Medium,用途:含琼脂,用于霉菌分离培养
抗生素培养基40号,英文名:Medium 40,用途:用于微生物方法测定抗生素效价
人热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒,英文名:Human HSP47 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠/钾离子交换ATP酶β肽(ATP4β)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ATP4β ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠血小板反应蛋白4(THBS4)ELISA试剂盒,英文名:Mouse THBS4 ELISA Kit,规格:48T/96T
JCA-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SGC-7901细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
HBdSMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。