CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞系 多少天开始传代
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细菌L型分离琼脂,英文名:L-Bacterial Isolation Agar,用途:用于样本中L型细菌的分离培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸/尿嘧啶缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
苛养厌氧菌琼脂,英文名:Fastidious Anaerobe Agar (FAA),用途:用于厌氧菌的培养
人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒,英文名:Human Col Ⅱ ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠半胱酸蛋白酶YZ剂(CSTA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CSTA ELISA Kit,规格:48T/96T
动力-盐培养基(B法)基础,英文名:Power-nitrate Medium,用途:用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGYT基础),英文名:TPGY Broth(TPGYT Base),用途:用于肉毒梭菌增菌培养,添加1:250胰蛋白酶配制成TPGYT
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H1703[H1703]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Tca-8113细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3-1:4传代,2-3天1次
B16BL6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
酵母膏-麦芽膏琼脂,英文名:ISP Medium 2(Yeast Extract Malt Extract Agar),用途:用于链霉菌属的培养鉴定
TYC肉汤培养基,英文名:Tryptone Yeast Cystine Broth Medium,用途:用于血链球菌的分离,每100ml可选择性添加1支多粘菌素B溶液以增加选择性
硅酸盐细菌液体培养基,英文名:Silicate Bacteria Fluid Medium,用途:用于硅酸盐细菌的培养
改良月桂基盐胰蛋白胨(mLST)肉汤基础,英文名:Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth Base,用途:用于阪崎肠杆菌增菌,每100ml中加入万古霉素1mg
四号琼脂基础,英文名:No.4 Agar Base,用途:用于霍乱弧菌选择性分离,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
SW 900[SW-900,SW900]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCC-HPF-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
J45.01细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H774[H774]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
MA891细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BRL细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
SV40-MES-13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:心肌成纤维细胞样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
MCF7B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
143TK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GL261细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
金氏B培养基,英文名:King’s B Medium,用途:用于绿脓杆菌产荧光鉴定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
幽门螺杆菌液体培养基基础,英文名:Helicobacter pylori Broth Medium Base,用途:用于幽门螺杆菌的增菌培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
细胞形态特性:详见细胞说明书
酵母浸膏葡萄糖土霉素琼脂培养基基础,英文名:OGYE Agar Base,用途:用于霉菌、酵母菌计数,葡萄糖20g/L,每100ml添加1支土霉素溶液
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
人化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒,英文名:Human AMPK ELISA Kit,规格:48T/96T
人釉原蛋白X-连锁(AMELX)ELISA试剂盒,英文名:Human AMELX ELISA Kit,规格:48T/96T
Hat-78细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
EJ138细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KMY1022细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠二辛酸转乙酰酶(DLAT)ELISA试剂盒,英文名:DLAT ELISA Kit,规格:48T/96T
人趋化因子C-C-基元受体4(CCR4)ELISA试剂盒,英文名:Human CCR4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人丝酸/苏酸/酪酸激酶1(STYK1)ELISA试剂盒,英文名:Human STYK1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Strail)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Strail ELISA Kit,规格:48T/96T
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(尿嘧啶/亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
血琼脂基础,英文名:Blood Agar Base,用途:用于血琼脂制备,需添加无菌脱纤维绵羊全血
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
CMT167细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
Hce-8693细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Toledo细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:每2-3天换液
NCI-H2107[H2107]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
K2培养基基础,英文名:K2 Medium Base,用途:用于镰刀菌的选择性分离,每100ml培养基需添加1支链霉素溶液
改良桑塔基氏培养基基础(含2.5%NaCl),英文名:Starkey,s Medium Base, Modified with 2.5% NaCl,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂,英文名:Casein Digest Soybean Agar for Pzase Test,用途:用于吡嗪酰胺酶检测,溶解于Tris-马来酸缓冲液(0.2mol/L,pH6)中
HTM培养基基础,英文名:HTM Medium Base,用途:用于副嗜血杆菌纸片扩散法药敏试验,每100ml添加1支无菌辅酶Ⅰ(NAD)溶液