NT2/D1细胞：人畸胎瘤细胞系 低代次传代培养

NT2/D1细胞：人畸胎瘤细胞系 低代次传代培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
常见细胞培养中一些问题总结：1)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%，不要低于5%或高过20%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%，可以适量加减；2)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；3)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；4)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；6)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
NT2/D1细胞：人畸胎瘤细胞系 低代次传代培养
细胞生长特性：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NT2/D1细胞：人畸胎瘤细胞系 低代次传代培养
细胞背景资料：畸胎瘤；肺转移；男性
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：1)CO2培养箱：CO2培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要；2)烘箱(干燥箱)：用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，烘箱内温度一般要达到160℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外，移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
NT2/D1细胞：人畸胎瘤细胞系 低代次传代培养
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。

MHCC97-H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台）
OVTOKO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台）
2-Methoxypyrazine
4-Chloro-3-Fluorobenzaldehyde
2-Fluoro-4,5-diMethoxybenzonitrile
N-(2-AMino-1,1-diMethylethyl)-n,n-diMethylaMine
6,7-DiMethoxy-1-tetralone, 97%
PANC-28细胞系(人癌细胞冷藏平台）
KYSE450细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
HIEC细胞系(人正常肠上皮细胞冷藏平台）
LX-2细胞系(人肝星状细胞冷藏平台）
GES 1细胞系(人胃粘膜细胞冷藏平台）
HIEC细胞系(人正常肠上皮细胞冷藏平台）
IEC-6[IEC6]细胞系(大鼠小肠隐窝上皮细胞冷藏平台）
2-chloro-4-fluoro-1-nitrobenzene
Procion Blue H-5R
hyodeoxycholic acid methyl ester
4-Bromo-2-Nitro aniline
4-Chloronitrobenzene
HCT-15[HCT15]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
CT-26.WT细胞系(小鼠大肠癌细胞冷藏平台）
NCI-H322细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
EOC 20细胞系(小鼠小神经胶质细胞冷藏平台）
AD293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
NCI-H1569细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Tb 1 Lu细胞系(蝙蝠肺细胞冷藏平台）
NCI-H520[H520]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
H-4-II-E细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台）
C3H/10T1/2,Clone 8细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
DT40细胞系(鸡淋巴瘤细胞冷藏平台）
5-Norbornene-2,3-dicarboxylic acid
Diisopropyl cyanoMethylphosphonate, 97%
2,4-DiMethyl-2-pentenoic acid, predoMinantly trans, 99%
Pyridine-2-boronic acid
1-(2-Cyanophenyl)
Colo-16细胞系(人皮肤鳞状细胞冷藏平台）
YD-38细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台）
HRC-99细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台）
CHO-dhFr-细胞系(ZG仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
WEHI 231细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台）
SVG P12细胞系(人星形胶质细胞冷藏平台）
5-Hydroxy-3,4-diMethoxybenzaldehyde
4,7-Dichloro-8-fluoro-2-(trifluoroMethyl)quinoline
5-(4-BroMophenyl)-3-Methyl-1,2,4-oxadiazole, 97%
ERYTHROMYCIN PHOSPHATE
TriMellitic Acid
DU-145细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
FRTL-5细胞系(大鼠甲状腺细胞冷藏平台）
PIG1细胞系(人皮肤黑色素细胞冷藏平台）
MDA-MB-175细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
Hep G2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
OC-3-VGH细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
DOK细胞系(人口腔黏膜癌前病变细胞冷藏平台）
NCI-H1975细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NOMO-1细胞系(人白血病细胞冷藏平台）
DU145[DU145,DU-145]细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
H-EMC-SS细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台）
SG231细胞系(人胆管上皮癌细胞冷藏平台）
SKOV-3细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台）
8910PM细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
SFPAC-1细胞系(人癌细胞冷藏平台）
GP293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
293T细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
3-Bromo-1,8-naphthyridine
1-adamantyl bromomethyl ketone
3-Aminobenzyl alcohol
LC1 ELISA Kit
SW1463细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台）
LoVo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
HCC细胞系(人子宫高分化鳞癌细胞冷藏平台）
CFSC-2G细胞系(大鼠肝星形细胞冷藏平台）
NCI-H226[H226]细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台）
4-Hydroxy-l-isoleucine
5-Amino-4-bromo-3-phenyl-1H-pyrazole 95+%
4-Fluoro-?,?,?-trifluoroacetophenone
1-[5-(tetrahydrofuran-2-yl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]methanamine(SALTDATA: FREE)
Methylparaben
KP-N-YN细胞系(人脑神经母细胞冷藏平台）
SNU-368细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
BAEC细胞系(牛主动脉内皮细胞冷藏平台）
NCI-H2108[H2108]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
RK-13细胞系(兔肾细胞冷藏平台）
BV173细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台）
NCI-H524细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TNFaR ELISA Kit
Human PA-IgG ELISA Kit
Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA Kit
FGL1 ELISA Kit
Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit
CXCR3 ELISA Kit
Human DEFα1 ELISA Kit
Human SCL70/topoⅠ ELISA Kit
RWPE-2细胞系(人前列腺正常细胞冷藏平台）
DU-145细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
Caski细胞系(人子宫腺癌细胞冷藏平台）
3T3NIH细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
BDCM细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台）
UO31细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
H-4-II-E细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台）
SP2/0细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台）
A253细胞系(人唾液腺肿瘤细胞冷藏平台）
hASMC细胞系(人气道平滑肌细胞冷藏平台）
Z-Gln(Trt)-OH
3-(1,2,3,6-Tetrahydropyridin-4-yl)-1H-indole
2-chloro-3-(trifluoromethyl)benzoic acid
CpG-ODN ELISA Kit
293 AAV细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
MOLT-3细胞系(人急性T淋巴母细胞冷藏平台）
MEL526细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
ABC-1细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2023[H2023]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
DI-N-BUTYLTIN SULFIDE
4-Hydroxybenzoic acid, 99+%
3-(4-Methoxyphenyl)-5-isoxazolecarboxylic acid
(1-ethylpyrrolidin-3-yl)methanol(SALTDATA: FREE)
1,1?Bis((2S,5S)-2,5-di-i-propylphospholano)ferrocene, min. 97%
CT26细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台）
EMT6细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
HSkMC细胞系(人骨骼肌细胞冷藏平台）
Sol8细胞系(小鼠骨骼肌肌肉母细胞冷藏平台）
NCI-H64[H64]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
FaDu细胞系(人咽鳞癌细胞冷藏平台）
Bv-2细胞系(小鼠小胶质瘤细胞冷藏平台）
Pre-α2 MG ELISA Kit
Human EBF2 ELISA Kit
Human MCT ELISA Kit
Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
TIEG1 ELISA Kit
DEV ELISA Kit
Human PRL ELISA Kit
Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit
BHK细胞系(仓鼠肾成纤维细胞冷藏平台）
COLO320DM细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
Sf-9细胞系(昆虫细胞冷藏平台）
BT-483细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台）
NCI-H1437细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
VA-ES-BJ细胞系(人上皮样肉瘤细胞冷藏平台）
HCT116[HCT116]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
SalicylaMide
LithiuM aluMiniuM deuteride
1-Ethyl-1-MethylpyrrolidiniuM Tetrafluoroborate
2'-AMinobiphenyl-3-carboxylic acid
4-Acetylphenyl isocyanate, 97%
MKN-28细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
LWnt-3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台）
AKR细胞系(小鼠食管癌细胞冷藏平台）
ED-25细胞系(人肝静脉内皮细胞冷藏平台）
Lec1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
HFT-8810细胞系(人儿胸腺细胞冷藏平台）
ME-1细胞系(人急性髓白血病细胞冷藏平台）
(±)-trans-1,2-Diaminocyclohexane
isobutyl anthranilate
glucosamine
Tiglic aldehyde
Methyl 4-formylbenzoate
CP70细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
C127细胞系(小鼠乳腺肿瘤细胞冷藏平台）
OMC-1细胞系(人眼脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台）
NCI-H1355细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
HS-746T细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
SNU-638细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
SVEC4-10细胞系(小鼠淋巴结血管上皮样细胞冷藏平台）
MKN7细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
ER-30细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
NK-92MI细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台）
RGM-1细胞系(人正常胃粘膜上皮细胞冷藏平台）
H-Glu(Oet)-OH
2,4,5-Trifluorobenzaldehyde, 97%
9-Hydroxy-9-fluorenecarboxylic acid, 97%
Bis(2-chloroethyl)aMine hydrochloride
HexafluMuron
MN9D细胞系(小鼠中脑多巴胺能神经元细胞冷藏平台）
SW1222细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
HOP-92细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
JVM-3细胞系(人慢性髓细胞冷藏平台）
BE(2)-M17细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
CHP-126细胞系(人成神经细胞冷藏平台）
2-Cyano-6-fluorophenylboronic acid
ChlorodiMethylphenylsilane, 95%
DiethylcyanaMide, 99+%
2,3-DibroMopropene
PhenylMagnesiuM Chloride (27% in Tetrahydrofuran, ca. 2Mol/L)
LCC细胞系(人喉癌细胞冷藏平台）
KG-1a细胞系(人急性白血病细胞冷藏平台）
KYSE520细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
CTLL-2细胞系(小鼠T淋巴细胞冷藏平台）
NG108-15[108CC15]细胞系(小鼠神经母瘤与大鼠胶质瘤之融合细胞冷藏平台）
CCF-STTG1细胞系(人脑星形细胞冷藏平台）
KATO III细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
Hs 578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
TG HAVSMC细胞系(人主动脉血管平滑肌细胞冷藏平台）
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台）
MC3T3-E1Subclone14细胞系(小鼠颅顶前骨细胞冷藏平台）
A2780细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
TR4912细胞系(人成纤维细胞冷藏平台）
SW480[SW480,SW-480]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
PFSK-1细胞系(人恶性胚瘤细胞冷藏平台）
E.G7-OVA细胞系(小鼠T淋巴瘤细胞冷藏平台）
B16-F1细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台）
methyl 2-[(R)-benzhydrylsulfinyl]acetate
BOC-D-ARG(TOS)-OH ETOAC
3-Piperidineacetic acid
Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
SW579[SW579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台）
NCI-H841[H841]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Hep G2[HEPG2]细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
EFM-192C细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HCASMC细胞系(人冠状动脉平滑肌细胞冷藏平台）
2-Chloro-1,1,1-triMethoxyethane
N-Ethyldiisopropylamine
5-Chlorobenzofuran-2-carboxylic acid ,97%
1H-Pyrazolo[3,4-b]pyridine ,97%
Manganese(II) 2-ethylhexanoate, 40% solution in mineral spirits (6% Mn)
HCC-2108细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
HRT-S1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
MKN74细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
RWPE-2细胞系(人前列腺正常细胞冷藏平台）
Hth74细胞系(人未分化甲状腺癌细胞冷藏平台）
MKN-45细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
SH-SY5Y细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
LN ELISA Kit
Human Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit
BMP7 ELISA Kit
αFP ELISA Kit
Pentodine ELISA Kit
IFN-β/IFNB ELISA Kit
TSA ELISA Kit
Human SRY ELISA Kit
NCI-H1793[H1793]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NSC-34细胞系(小鼠神经元细胞冷藏平台）
Loucy细胞系(人淋巴细胞冷藏平台）
M109细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台）