P19细胞:小鼠睾丸畸胎瘤细胞系 更低代次传代培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
P19细胞:小鼠睾丸畸胎瘤细胞系 更低代次传代培养
细胞生长特性:贴壁生长
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:上皮样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
P19细胞:小鼠睾丸畸胎瘤细胞系 更低代次传代培养
细胞背景资料:P19细胞株是从C3H/He小鼠中诱导的恶性畸胎瘤中建立的。该细胞在含有0.1mM的培养基中可GX率地克隆。该细胞具有多能性,在500nM维A酸诱导下可以分化成神经和神经胶质样细胞;在0.5%~1.0%二甲亚砜(DMSO)存在下,分化形成心脏和骨骼肌样细胞,但不形成神经或神经胶质样细胞;在DMSO和维A酸同时存在时,细胞的分化与只有维A酸一样。
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
P19细胞:小鼠睾丸畸胎瘤细胞系 更低代次传代培养
细胞传代方法:1:2传代
OCI-AML5细胞系(人急性髓白血病细胞冷藏平台)
PSN1细胞系(人癌细胞冷藏平台)
MDA-kb2细胞系(人正常乳腺细胞冷藏平台)
5-Bromopyrimidine
TriMethylhydroquinone
trans-1,2-Dichlorocyclohexane
1-(3-BroMophenyl)cyclobutanecarboxylic acid
Silver hexafluorophosphate, 98%, -6 Mesh
SK-HEP-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Acc-2细胞系(人涎腺腺样囊性癌细胞冷藏平台)
Vero细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
SW 900[SW-900]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW 1271[SW-1271]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
SW 900[SW-900]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
ESC-410细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
2-Amino-4-fluorophenol
2-Nitrobenzyl bromide
Ethyl 2-bromoisobutyrate
Cinnamoyl chloride
3,5-Di-tert-butyl-4-hydroxybenzyl alcohol
HO-8910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
GOS-3细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
HIBEpiC细胞系(人肝内胆管上皮细胞冷藏平台)
MRC-9细胞系(人胚肺细胞冷藏平台)
NCI-H209[H209]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1417[H1417]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SNU-423细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
SCC-15细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
HCAEC细胞系(人冠状动脉内皮细胞冷藏平台)
BNL CL.2细胞系(小鼠胚肝细胞冷藏平台)
HCMEC细胞系(人心脏微血管内皮细胞冷藏平台)
5-BroMoisoquinoline
5-Ethylidene-2-norbornene, endo + exo, 98%, stab. with 100ppM 4-tert-butylcatechol
4-AMinobutyric acid, 97%
3-BroMo-5-nitrobenzotrifluoride
PCB No 33
NCI-H128细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC-1833细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H28[H28]细胞系(人恶性间皮瘤细胞冷藏平台)
RIN-m细胞系(褐鼠胰岛素瘤上皮细胞冷藏平台)
AMO-1细胞系(人浆细胞冷藏平台)
SH-77细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
2-Cyano-1-(4-Methoxyphenyl)-2(1H)-pyridinone
3-tert-Butylphenol, 99+%
4-Phenylpyridine, 99%
2,3,5-TRI-O-BENZYL-BETA-D-ARABINOFURANOSE
1-Chloro-3,5-difluorobenzene
HES细胞系(人胚胎皮肤成纤维细胞冷藏平台)
MEF-11细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
KS-1细胞系(人胶质母细胞冷藏平台)
MOVAS细胞系(小鼠主动脉血管平滑肌细胞冷藏平台)
HUC细胞系(人尿道上皮细胞冷藏平台)
HX147细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
GA-10(Clone 4)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
HEL-1细胞系(人胚肺二倍体细胞冷藏平台)
BRL 3A细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台)
hRPE细胞系(人视网膜色素上皮细胞冷藏平台)
SW 900[SW-900,SW900]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台)
AHH-1细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
SNU-638细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H2135细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HT 1197细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
Capan-2细胞系(人癌细胞冷藏平台)
N(alpha)-boc-N(omega)-mtr-L-arginine
4-Cyano-4-(Thien-2-Yl)Cyclohexanone
Methyl 2-cyano-2-(3-tetrahydrothienylidene)acetate
iNOS ELISA Kit
CCC-HEH细胞系(人胚胎心肌组织来源细胞冷藏平台)
TU 686细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
NCI-H2135细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW 1353[SW 1353,SW-1353]细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
293T细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
H-LYS(Z)-OME HCL
Ethyl trifluoroacetate 99%
Benzamide, 99%
2-Amino-2-thiazoline, 97%
Dibismuth(III) molybdenum(VI) oxide 99%
NCI-H727细胞系(人肺支气管良性肿瘤细胞冷藏平台)
SJSA-1细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
Nthy-ori 3-1细胞系(人甲状腺正常细胞冷藏平台)
ATDC5细胞系(小鼠胚胎瘤细胞冷藏平台)
PG-LH7细胞系(人肺癌低转移细胞冷藏平台)
BRL细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台)
HT-29细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
IL-10 ELISA Kit
MBP ELISA Kit
Human IP-10/CXCL10 ELISA Kit
Hpt/HP ELISA Kit
CTXⅢ ELISA Kit
TAA ELISA Kit
Human C1q ELISA Kit
Human ADSL ELISA Kit
RGC-5细胞系(小鼠视网膜神经节细胞冷藏平台)
SK-N-SH细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
SNU-C1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H774[H774]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
RAEC细胞系(大鼠主动脉血管内皮细胞冷藏平台)
HSC-3细胞系(人口腔鳞癌细胞冷藏平台)
JurkatCA细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
HCC-44细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
COLO 829细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
Huh-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
;1-Bromo-3-tert-butylbenzene
2-Chloro-5-methylphenol
phenethyl isobutyrate
Anti-GM1 ELISA Kit
NCI-H2196细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MC53细胞系(小鼠肾系膜细胞冷藏平台)
CT-26细胞系(小鼠大肠癌细胞冷藏平台)
NAMALWA细胞系(人Burkitt's淋巴瘤细胞冷藏平台)
Neuro-2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
1H-Imidazole-4-carbothioamide , 97%
4-Formyl-2-isopropylthiazole
Cholesterol Hydrocinnamate
Bicyclo[3.3.1]nonan-9-one, 99%
HEXAFLUOROGLUTARYL CHLORIDE
MC53细胞系(小鼠肾系膜细胞冷藏平台)
HCAEC细胞系(人冠状动脉内皮细胞冷藏平台)
NCI-H2029[H2029]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Pt-K2(PtK2)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
HLEC细胞系(人淋巴内皮细胞冷藏平台)
Sf-9细胞系(昆虫细胞冷藏平台)
HDF-n细胞系(人成纤维细胞冷藏平台)
TTR ELISA Kit
Human phosphofructokinase-platelet,PFKP ELISA Kit
Human choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit
TECK ELISA Kit
Rat high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
BAD ELISA Kit
Human DUB ELISA Kit
Human Inhibin,INH ELISA Kit
KATO III细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HB611细胞系(人肝母细胞冷藏平台)
SW837[SW-837]细胞系(人结直肠腺癌上皮细胞冷藏平台)
NAMALWA细胞系(人Burkitt's淋巴瘤细胞冷藏平台)
AN3CA细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
G361细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
hEM1细胞系(人子宫异位内膜上皮细胞冷藏平台)
2-FLUORO-5-FORMYLBENZONITRILE
Ethyl oleate
SodiuM 4,6-Dihydroxynaphthalene-2-sulfonate
N-(2,6-DiMethylphenyl) 2-broMobenzaMide
Trifluoroacetic anhydride, 99+%
VEROE6细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
NW38细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
HPSC细胞系(人星状细胞冷藏平台)
SW 780细胞系(人膀胱移行细胞冷藏平台)
K7M2 wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台)
CNE1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
OPM-2细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
cis-1,2-Cyclohexanedicarboxylic acid;cis-Hexahydrophthalic a...
Cyclopentylmalonicacid
cis-5-dodecenoic acid
1-ethyltricyclo[3.3.1.1~3,7~]decane
1,1'-Bi-2-naphthol
LAD2细胞系(人肥大细胞冷藏平台)
3T3细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
RPMI 6666细胞系(人霍奇金淋巴瘤细胞冷藏平台)
Huh-7细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
RAW 264.7细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台)
K7M2wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台)
NRK49F细胞系(大鼠肾细胞冷藏平台)
DMS 79细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1581[H1581]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Ana-1细胞系(小鼠巨噬细胞冷藏平台)
FDC-P1细胞系(小鼠细胞冷藏平台)
(1S,5R)-10,10-DiMethyl-3-Thia-4-Azatricyclo[5.2.1.0(1,5)]Decane 3,3-Dioxide
4-Ethoxypiperidine hydrochloride
Ethoxytriethylsilane, 97%
2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl isothiocyanate
Chlorpyrifos-Methyl Standard
HCO细胞系(人颅骨成骨细胞冷藏平台)
293 AAV细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
MLE-12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
L-cell细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台)
MM1S细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
Karpas-299细胞系(人间变性大细胞冷藏平台)
N-Methyl-4-nitro-N-[2-(4-nitrophenoxy)ethyl]phenylethylaMine
3-(3-Fluoro-4-Methylphenyl)aniline
Benzo[k]fluoranthene, 99+%
Isatin
4-Chloro-2-fluoronitrobenzene
HONE1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
Hepa2细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
NCI-H1105[H1105]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MOLT-4细胞系(人急性淋巴母细胞冷藏平台)
293H细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SW620[SW620,SW-620]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
HNE2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
SW 626细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H226细胞系(人肺鳞状癌细胞冷藏平台)
Beta-TC-6细胞系(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞冷藏平台)
Bcap-37细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
VERO C1008细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
SEG1细胞系(人食管腺癌细胞冷藏平台)
KYSE450细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
BIU-87细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
PK(15)[PK15,PK-15]细胞系(猪肾细胞冷藏平台)
LC-1sq细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
2,2,3,4,4,4-Hexafluorobutyl methacrylate
2-PIPERAZIN-1-YL-PHENYLAMINE
Lilolidine
CDK9 ELISA Kit
MDCK-2细胞系(狗肾细胞冷藏平台)
K562细胞系(人慢性髓系白血病细胞冷藏平台)
NCI-H2196[H2196]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
H3255细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
COLO-679细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
(R)-(?)-1-(4-Fluorophenoxy)-2-propanol
Vinylphenyldimethylsilane
2,8-diazaspiro[4.5]decan-3-one(SALTDATA: 2HCl)
Ethyl 2-Cyano-3,3-diphenylacrylate
2-(3-Methoxyphenoxy)ethanamine
SK-N-AS细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
SNU-886细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
NUGC-4细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HONE-1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
MPP 89细胞系(人间皮瘤细胞冷藏平台)
H2126细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CCRFS-180细胞系(小鼠肉瘤细胞冷藏平台)
BMG/β2-MG ELISA Kit
Human OBSCN ELISA Kit
Human SNX13 ELISA Kit
HMG-CoA ELISA Kit
IGFBP3 ELISA Kit
VEGF165 ELISA Kit
Human GAL2 (Galectin 2 ) ELISA Kit
Plg ELISA Kit
SKG-IIIa细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
HP615615细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台)
MDA-MB-435细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
KATOIII细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)