一、技术简介重组蛋白表达纯化(原核,酵母):大量制备的重组蛋白可用于药物筛选、结构生物学研究、细胞生物学研究、蛋白质组学研究等的一系列生物医学领域的研究。其中原核蛋白表达系统是迄今为止Z为成熟可靠的蛋白表达系统,能快速表达纯化各种不同来源蛋白。
蛋白表达纯化服务包括密码子优化、基因合成、表达载体的构建、小规模的蛋白表达与纯化和大规模的蛋白表达与纯化等。已建立多种蛋白质表达系统,包括原核表达系统、酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统,并掌握了多种蛋白纯化技术,完全可以满足客户不同的需求。
将目的基因连接在表达载体后,通过加入诱导剂IPTG诱导目的基因表达。表达载体除具有蛋白表达所需要的启动子外,在终止子前有6个His编码序列,便于蛋白的亲和层析纯化。亲和层析以蛋白质或生物大分子和结合在介质上的配基间的特异亲和力为基础。
二、实验流程1. 表达构建:a.密码子优化和基因合成服务;b.各种表达载体构建服务。
2. 小规模表达和纯化:a.表达条件优化;b.小规模蛋白的纯化;c.瞬时转染表达与纯化。
3. 稳定细胞系的建立:a.重组酵母筛选服务;b.稳定表达的哺乳动物细胞系建立。
4. 重组杆状病毒:a.重组杆状病毒的扩增与纯化;b. 昆虫细胞表达与蛋白纯化。
5. 纯化方案:a.亲和层析;b.凝胶过滤;c.疏水层析;d.离子交换。
三、服务说明及结果1. 客户提供:客户需要提供蛋白名称,属性或基因序列。
2. 公司提供:亲和层析纯化后的蛋白质。
3. 实验周期:40-60个工作日。
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