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名称:Cas9蛋白(Cas9核酸酶)怎么卖
编号:JN0065
规格:50U
英文名:Cas9 Protein
品Pai:百奥莱博
产地:北京
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相应的CRISPR RNAs(crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列的降解,从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。
产品特点:纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途:
1、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除;
2、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入;
3、sgRNA剪切靶点DNA的效率检测,降低体内筛选成本;
4、体外剪切靶DNA的特异位点。
应用实例:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/JN0065.jpg)
图例一)Cas9核酸内切酶DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段:6100bp;酶切后的片段:3900bp和2200bp。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/Cas9%20Protein.jpg)
活性定义:37℃,在sgRNA足量的20μL反应体系中,1h完全切割1μg质粒或线性化DNA所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留;无核酸内、外切酶污染;无RNase污染。
体外切割体系(20μl):
组分 | 体积 |
dsDNA | 200nM |
sgRNA | 100nM |
Cas9酶 | 1U |
10×Reaction Buffer | 2μL |
RNase Free Water | To 20μL |
37℃反应1h,琼脂糖胶电泳检测 |
*可在反应体系中添加20U的RNase Inhibitor,防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。
储存条件:-20℃
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(333).jpg)
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