重组小鼠白介素IL-33(白细胞介素33) 重组蛋白

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名称：重组小鼠白介素IL-33(白细胞介素33) 重组蛋白
编号：JN0385
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
英文名：Recombinant Mouse Interleukin-33
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备，目的基因编码的Ser109-Ile266表达纯化而来。

IL-33质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)。

IL-33制剂：冻干品

IL-33保存：
冻干蛋白可在-20℃长期保存，室温也可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天。
复溶后建议分装冻存在-20℃，可保存3个月，应避免反复冻融。

IL-33复溶：
1、试剂开盖前请先离心。
2、复溶浓度应大于100μg/ml.
3、冻干蛋白溶于ddH2O中
4、复溶后根据使用量分装保存，避免反复冻融。

关于IL-33：
Mouse Interleukin 33 (IL-33) is a 30 kDa proinflammatory cytokine which may also regulates gene transcription in producer cells. IL-33 is constitutively expressed in smooth muscle and airway epithelia. IL-33 was identified based on sequence and structural homology with IL-1 family cytokines. It is up‑regulated in arterial smooth muscle, dermal fibroblasts, and keratinocytes following IL-1 alpha or IL‑1 beta stimulation. IL-33 is structurally related to IL-1, which induces helper T cells to produce type 2 cytokines and acts through the receptor IL1RL-1. BindingIL-33 to this receptor activates NF-kappa-B and MAP kinases and induces in vitro Th2 cells to produce cytokines. In vivo, IL-33 induces the expression of IL-4, IL-5, IL-13 and also leads to severe pathological changes in mucosal organs.

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BTN150802 棉蓝乳酚油染色液 Lactic Acid Phenol Cotton Blue Staining Solution
HR0393 透析袋27mm，截留分子量25kd Dialysis bag 27mm, entrapped MW 25kd
SV1391 RNase 污染检测试剂盒
YT201 AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM) AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
BTN131083 Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒 Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
ALH069 DNA/RNA/miRNA分离提取试剂盒 Tissue Cells DNA/RNA/microRNA  Extraction & Isolation Kit
SV0566 NruI-HF限制性内切酶 NruI-HF Restriction Endonuclease
WE0190 通用型柱式DNA提取试剂盒 Universal Genomic DNA Extraction Kit
BTN90904 膜结合DNA清除试剂盒 Membrane-Bound DNA Scavenger
SV1032 电转连接酶
RFT007 300bp DNA ladder(300～5000bp)
KFS135 尼氏小体染色剂—甲**(代"胺")蓝
SY0364 10×Tris-Glycine Native电泳缓冲液 10×Tris-Glycine Native Running Buffer
YT466 C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) C-EGFP plasmid（with CMV promoter）
BTN120642 一站式Blue Native PAGE电泳套装 One-Stop Blue Native PAGE Pack
HR0209 昆虫蛋白快速提取试剂盒(离心柱法) Insect protein rapid extraction kit (centrifugal column method)
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·Pfu DNA聚合酶
编号：JN0016
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：250U|250U×5
  本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol基因在大肠杆菌中进行表达后经多步纯化分离而得。Pfu DNA聚合酶具有3´→5´外切酶(校正)活性，当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。Pfu DNA聚合酶为使用范围Z广的高保真DNA聚合酶，其错误率仅为1.3x10-6，推荐Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反应。

产品组成：

 

组份	JN0016-250U
Pfu DNA聚合酶（5U/μl）	50μl
dNTP混合液(各10mM)	200μl
10×Pfu DNA Buffer with Mg2+	2ml

产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成，DNA片段的补平等（参见实验方案）。

使用建议：
Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3´端"A"突出，其PCR产物的克隆有几种方案。
1、PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见实验方案）。
2、将产物3´末端加A后再与T载体连接（参见实验方案）。
3、引物中引入15bp与载体同源序列，利用BalbRec PCR产物一步定向无缝克隆试剂盒（Cat# JN0001）直接连接到目的载体。
由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并加入Pfu酶。

应用实例：


图例一）50μl扩增体系中，以5ngλDNA为模板，对500bp～6.0kb片段的扩增结果。
泳道1：0.5kb；泳道2：1.0kb；泳道3：2.0kb；泳道4：3.0kb；泳道5：4.0kb；泳道6：6.0kb泳道M：1kb DNA Marker；

图例二） 50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（380bp）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA 2000 Ladder

常用反应体系（50μl）

10×Pfu Buffer	5μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
Pfu	0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为1.5mM

常用PCR循环：

当扩增片段<3K：

温度	时间	循环数
94℃	1分钟30秒
94℃	30秒	30次循环
57℃	30秒
72℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：

温度	时间	循环数
94℃	20秒
94℃	5秒	30次循环
68℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。



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SV0827 CutSmart Buffer（10X）
BTN131021 链霉亲和素 Streptavidin
KFS033 即用型免疫组织化学SP试剂盒(Rabbit)
SY0260 双链DNA定量检测试剂盒 Picogreen dsDNA Assay Kit
RFT104 M-MLV反转录酶(RNase H-) Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
BTN81218 植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用) Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE)
HR0001 总蛋白提取试剂盒 Total protein extraction kit
YT606 谷胱甘肽合成酶1 Glutathione Synthase 1 (Crude Enzyme)
BTN81026 一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法) One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit
BTN100816 碱性胶电泳液 10×Alkaline Gel Buffer
SV1382 T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q
YT196 AP1凝胶迁移突变探针(1.75μM) AP1 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
KFS278 5-*脲嘧啶(5-Fluorouracil) 5-Fluorouracil
SY0514 人纤维连接蛋白 Human Fibronectin
SV0550 NmeAIII限制性内切酶 NmeAIII Restriction Endonuclease
WE0185 血块基因组DNA提取试剂盒 BloodClot Blood DNA Extraction Kit
HR0463 细胞衰老检测试剂盒 Cell senescence assay kit
SY0156 STAT1-GFP报告基因质粒 STAT1 GFP Reporter Plasmid

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