微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测

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北京百奥莱博专业生产供应微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测，我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测
编号：ZN1874
规格：1盒
品Pai：百奥莱博
产地：北京
产品规格：
溶液A 100ml
溶液B 100ml
溶液C 5ml
蛋白标准品20ml(2mg/ml)
产品保存：室温保存，一年有效。
产品说明：
1．超敏感，检测浓度为0.5μg/mL。
2．线性范围在0.5～20μg/mL，尤其适用于低浓度的样品。
3．对大多数离子型和非离子型去污剂不敏感，但对Cu的还原剂和螯合剂敏感。
4．比Lowry法更加简单快捷。
5．试剂稳定，室温可以放置一年。
6．终产物稳定，检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7．Z短可以检测双肽，适合于分子量较小的蛋白质。
8．有常规(普通试管)和微量(96孔板)两种检测模式。
标准品以及工作液的制备：
A．牛血清白蛋白标准品稀释液的制备
注意：上表适用于微孔板法的标准品稀释，试管法的标准品稀释可按照具体使用量进行比例扩大。
B．微量BCA工作液的制备
1．使用下列公式计算出所需工作液的总体积：
(标准孔数+待测样品孔数)×(重复数)×(每个样品孔的工作液体积)=所需工作液的总体积
例如：标准的试管测定每个样品需要3个不同的稀释度和2次重复(8个标准孔+ 3个待测样品孔)×(2重复)×(1ml)= 22ml BCA工作液(可以多配到25ml)。
注意：在试管检测法中，每个样品需要1ml的工作液，在微孔板检测中，每个样品需要150μl的工作液。
2．配制BCA工作液：
先将溶液A、溶液B和溶液C按50：48：2的比例混合，所得溶液即BCA工作液。
比如：5ml溶液A + 4.8mL溶液B +200μl溶液C。
注意：试剂C刚加入到试剂A和试剂B中时，会产生浑浊并迅速消失呈清绿色溶液。制备足够体积的工作液以检测相应数量的样品。
使用方法：
一：微孔板测定法
1．吸取150μl的标准品及未知样品分别至微孔板中。
2．滴加150μl的工作液到每孔中并充分混合30秒。
3．盖上微孔板并在37°C孵育2小时或60℃放置1小时。
4．微孔板冷却至室温。
5．10分钟内在酶标仪上测量562nm时的吸光值。注意：冷却至室温后依然会继续显色。但是，在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值一般都不会有太大影响。
6．绘制标准曲线，测量样品的浓度。
二：试管测定法
1．吸取1.0ml的标准品及未知样品分别至对应标记的检测管中。
2．滴加1.0ml的工作液至每管中并充分混合。
3．盖上检测管并于60°C水浴孵育1个小时。
4．所有试管冷却至室温。
5．10分钟内在分光光度计上测量562nm时的吸光值。注意：冷却至室温后依然会继续显色。
但是，在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值一般都不会有太大影响。
6．绘制标准曲线，测量样品的浓度。

我公司的微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·小鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)检测试剂盒
编号：ZN2683
英文名称：Mouse Low-density lipoprotein receptor ELISA Kit
规格：96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中LDLR的含量。预先包被的抗体为LDLR多克隆抗体。检测相抗体为LDLR多克隆抗体，经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠LDLR呈正相关。

检测指标：LDL receptor；LDLR
检测范围：62.5pg/ml～4000pg/ml
特异性：系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性：＜2pg/ml

产品组成：

 

组分	规格	数量
预包被抗小鼠LDLR抗体的96孔板	96T	1板
重组小鼠LDLR标准品(冻干)	10ng/管	2管
生物素标记抗小鼠LDLR(100X)	130μl	1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)	130μl	1管
样品稀释液	30ml	1瓶
抗体稀释液	12ml	1瓶
ABC稀释液	12ml	1瓶
TMB显色液	10ml	1瓶
TMB终止液	10ml	1瓶
洗涤缓冲液(25X)	20ml	1瓶
封板膜		4张

储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）
有效期： 6个月(4℃)；12个月（-20℃）

参考标准曲线数据：(取自某一批次质检数据，仅供参考，用户需要自己建立标准曲线)

浓度(pg/ml)	0	62.5	125	250	500	1000	2000	4000
OD值	0.019	0.163	0.261	0.406	0.692	1.098	1.682	1.981

微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测关键词：微量BCA蛋白质定量试剂盒,ZN1874,百奥莱博


·Gsdma 3 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0622
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液2ml；
3.Gsdma 3 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml；
4.封闭液5ml；
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：Z重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Gsdma的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


微量BCA蛋白质定量试剂盒 免疫检测关键词：微量BCA蛋白质定量试剂盒,ZN1874,百奥莱博

GL0891 地衣红乙醇溶液(1%) 50ml
GL1964 肌酐(Cr)检测试剂盒(肌*酸氧化酶微板法) 100T
GL1571 硫*(代"酸")鱼精蛋白溶液(1%) 10ml
SNM420 定影粉 Fixing powder
GL0612 糖原PAS染色液 4×50ml|4×100ml
GL1722 柠檬酸—柠檬酸*缓冲液(1mol/L,pH6.0) 100ml|500ml
GL1319 RNase A(10mg/ml) 1ml|5ml
SNM218 总胆红素试剂盒(化学氧化法)(微板法) Total bilirubin (T-BIL) kit
GL0317 Hoechst33258染色液 10ml
GL1469 RIPA裂解液(弱) 100ml
GL1083 Apathy糖胶封片剂 50ml
SNM017 维生素B2荧光检测试剂盒 Vitamin B2 fluorescence detection kit
GL0027 盐*(代"酸")万古霉素溶液(10mg/ml) Vancomycin 10mg/ml 10ml
SNM561 肌*酸氧化酶(SAO) Sarcosine oxidase

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